第四章 植物器官培养.pptVIP

离体条件下对植物的根尖或根段等外殖体进行培养，经脱分化及再分化等过程再生出完整植株的过程。 培养方法与叶片培养相似。 包括愈伤组织诱导、不定芽分化、无菌苗的增殖与生根等。 四、离体根培养 * 图17 大蒜根尖培养及植株再生 ** 赤霉素类 赤霉素与促进细胞伸长和开花反应，组织培养条件下只在少数植物上对芽的诱导有促进作用。 如马铃薯、甜菜、樱桃等。 * 其他有机化合物： 腺嘌呤衍生物具有促进器官分化作用。 椰子汁等物质也具有促进分化的功能。 * A 光照 通常1000~5000 Lx 16 小时光照。 非洲菊1000 lx ，洋葱 16小时，马铃薯连续光照，葡萄要求短日照。 光质也影响芽的再生，蓝光有利于芽器官发生，烟草实验，而红光有利于根的发生。 （3） 培养条件及其他因素 * B 温度 大部分植物要求25 oC，少数要求较低温度（15 ~ 20 oC）或较高的温度（30 oC ） 如菖蒲、水仙、洋葱、龟背竹等。 变温处理对有些植物器官发生有促进作用，如豌豆。 * C、 培养基其他因素： 如活性炭（Activated Charcoal）、酚类物质（Phenolic compounds）、pH值、继代培养次数（subculture）、渗透压等。 * （二）无菌苗的增殖 1、增殖培养过程： 增殖培养过程是促进无菌苗数量增加的过程。主要通过芽增殖芽的过程进行。 * 图6 蝴蝶兰无菌苗的增殖培养 * 图7 玉簪无菌苗增殖培养 * （1）细胞分裂素浓度直接影响增殖的效果，通常使用浓度低于起始培养阶段。 高浓度细胞分裂素会导致植株玻璃化（Vitrification）等现象的发生，过低的浓度会影响增殖速率，因此应选择适宜的浓度。 （2）添加少量的生长素，如NAA或IAA有利于维持无菌苗适宜的激素平衡，促进增殖。 2、影响增殖的因素 * （3）增殖阶段要给予外植体适宜的温度和光照条件，才能保证其旺盛的增殖过程。 （4）增殖培养阶段要注意及时转接，否则生长变弱。 * 图8 蝴蝶兰和冬青的无菌苗增殖生长状态 * （1）小型化和无效苗 激素浓度过高导致无效苗增加。可以通过降低细胞分裂素浓度克服。 （2）玻璃化现象 琼脂用量低，相对湿度大，激素浓度高，温度高等导致玻璃化。 3、增殖培养中的常见问题 * （3）变异问题 继代次数过多或由愈伤组织途径形成的无菌苗的连续增殖；激素条件不适宜等易导致变异。 （4）污染问题 转接前未将污染材料分出造成交叉污染；培养环境无菌程度低。 * 增殖培养阶段形成的无根苗在适当的条件下诱导形成不定根的过程. （三）生根培养阶段 (Rooting) * （ 1）矿质营养： 76%的植物可以在MS, 1/2MS, 1/3MS培养基上正常生根。低盐有利于生根（White, Knop），提高Ca浓度有促进作用。 （2）碳源的影响 多数植物在20~30gL-1蔗糖有利于生根。 无蔗糖生根减少，浓度影响根重。 1、培养基成分对不定根形成的影响 * A. 生长素类：通常为生根必需；IBA、NAA等 （3） 植物激素及生长调节物质 B. 细胞分裂素： 通常有抑制作用； C. ABA 和 GA：ABA/GA3高比值促进生根。 * 图9 不同生长素对番茄生根的影响 * 图10 不同IBA浓度对番茄生根的影响 * （1）温度： 21-30 oC 对多数植物有利。 （2）光照因素:黑暗条件利于生根。 2、培养条件及其他因素的影响 * 1、透气锻炼： 逐渐打开瓶口，增加适应性，3－7天。 2、洗去培养基： 生根苗培养基中由于带有蔗糖而易滋生细菌和真菌。 （四）生根苗的驯化移栽 * 3、选择适宜的驯化基质： 透气保水性要好。蛭石、泥炭、珍珠岩等。 4、无菌苗移栽： 驯化锻炼的无菌苗栽植于基质中。水分要浇足，注意保湿，也要注意透气。 * 温度：低温季节提高根部温度。促进新根形成；高温季节注意降温。 湿度：成活前均要注意保湿，防治水分蒸腾。可以采取喷雾加湿。 光照：前期适当遮荫，保持弱光条件，成活后逐渐加强。 水分：移栽时浇足水，以后适当控制，不干不浇。 营养：组培苗新根形成前不施肥，成活后补充营养，采用营养液或复合肥等。