土壤中分解尿素的细菌分离和计数演示教学.pptVIP

测细菌(xìjūn)数： 测放线菌： 测真菌数： （2）样品(yàngpǐn)稀释? 稀释原因： 稀释标准(biāozhǔn)： 稀释倍数： 样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落数目 选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证获得菌落数在30-300之间，便于计数。 一般用104、105、106稀释液 一般用103、104、105稀释液 一般用102、103、104稀释液 思考：为什么分离不同的微生物要用不同的稀释度？ 土壤中各类微生物的数量不同 如果是第一次做这个实验，稀释倍数的范围 可以放宽103-107. 第二十页，共25页。 1 、关于土壤取样的叙述，错误的是（ ） A 土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤 B 先铲去表层土3-8cm左右，再取样 C 取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌 D 应在火焰旁称取土壤 2、下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离”实验步骤排列 正确的是 ①土壤取样 ②称取10g土壤加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中 ③吸取0.1ml进行(jìnxíng)平板涂布 ④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107 稀释度 A①②③④ B①③②④ C①②④③ D①④②③ C C 第二十一页，共25页。 （三）微生物的培养与观察 1、接种：用适当(shìdàng)的稀释液涂布平板 2、培养：细菌：30～37℃，1～2d; 放线菌:25～28℃, 5～7d; 霉菌: 25～28℃, 3～4d. 3、观察：a.每24h统计一次菌落数目 b.以“稳定菌落”为观察对象 　　 第二十二页，共25页。 （四）鉴定：筛选后必鉴定 鉴别培养基：不影响微生物的生存 酚红培养基：鉴定分解尿素的细菌(xìjūn)。 原理：脲酶催化尿素分解成氨→培养基碱性增强→ 酚红变红 第二十三页，共25页。 为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答(huídá)下列问题： (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ；然后，将水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为 。 第二十四页，共25页。 (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过 灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是 。 (3)示意图A和B中, 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。 (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析(fēnxī)其原因是：振荡培养能提高培养液中 的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高 的利用率。 第二十五页，共25页。 微生物的培养(péiyǎng)与应用 第一页，共25页。 细菌脲酶 分离产生(chǎnshēng)脲酶的细菌 尿素[CO(NH2)2]——重要的农业(nóngyè)氮肥。 只能被土壤中细菌(xìjūn)分解为NH3才能被植物吸 收利用 CO(NH2)2 + H2O CO2 +2NH3 课题背景 第二页，共25页。 课题(kètí)目的 土壤中尿素(niào sù)分解菌的分离 与计数 从土壤中分离出能够 分解尿素(niào sù)的细菌 统计每克土样中究竟 含有多少这样的细菌 第三页，共25页。 思考：PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能忍受93 ℃左右的高温。如果请你来寻找(xúnzhǎo)这种耐高温的酶，你会去哪里寻找(xúnzhǎo)？(　　) A．土壤中　　 B．海水中　　 C．热泉中　　 D．冷库中 C 如何寻找(xúnzhǎo)耐高温的酶？ —寻找(xúnzhǎo)高温环境； 原理：热泉70-80℃的高温条件淘汰了绝大多数的微生物，使