遗传学实验果蝇杂交设计书.pdfVIP

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遗传学实验果蝇杂交设计书 一、单因子试验 1、实验原理 分离定律( law of segregation )也称孟德尔分离定律。一对基因在杂合状态下不互相影 响,各自保持相对的独立性,而在形成配子的时候,就会互相分开,并按照原样分配到不同 的配子中去。 在一般情况下,配子的理论分离比是 1:1,子二代( F 2 )的基因型分离比是 1:2:1,若显 性完全, F 2 的表型分离比是 3:1 。杂种后代分离出来的隐性基因纯合体与原来隐性亲本在表 型上是一样的,隐性基因并不因为和显性基因在一起而改变它的性质。 单因子杂交是指一对等位基因间的杂交。 野生型果蝇是长翅( +/+ ),其长翅超出腹部末 端约 1/3. 残翅果蝇的双翅已经退化,只留下少量残迹( vg/vg ),无飞翔能力。 Vg 的基因座位 于第二染色体 67.0, 。对长翅( +)完全隐性。 用野生型长翅果蝇与残翅果蝇杂交, 子一代 (F1) 全是长翅。 子一代系内交配, 子二代 产生性状分离,长翅:残翅为 3:1, 。 基因型为 +/vg (长翅)雌雄均可产生两种配子 +和 vg,并且各占 1/2, 。简单列表可知 F 2 的性状比为 3:1 。 表 1 果蝇杂交实验的配子及双翅形状的遗传 F1 ♀配子 1/2 + 1/2 vg 1 F ♂配子 1/4 +/+ 1/4 +/vg 1/2 + 长翅 长翅 1/4 +/vg 1/4 vg/vg 1/2 vg 长翅 残翅 2、实验步骤 (1)确定杂交亲本,挑选处女蝇。 选用 2#与 18#为亲本进行杂交实验。 选用野生型长翅和突变型残翅果蝇为杂交亲本。 雌蝇一定要选处女蝇。 处女蝇的挑选方 法:亲本饲养 2 周之后,提前 10— 12 小时把培养瓶内所有活的成虫倒干净,然后在倒掉成 虫的 12 小时内吧新羽化的成虫倒出来,装进消毒过的培养瓶或者平底试管进行适度麻醉, 麻醉后放在消毒过的白瓷板或者硬纸板上把雌雄蝇分别挑出, 雌蝇即为处女蝇。 根据实验所 需处女蝇数量的多少,可连续收集,但不要超过 3 天。 (2 )配好杂交组合,进行正、反杂交。 正交组合: 野生型长翅 (♀)×突变型残翅 (♂)。用消毒过的毛笔把 3—4 只长翅处女蝇 扫入培养瓶中, 然后把培养瓶水平放置, 一面麻醉状态下的果蝇沾到培养基或水珠而被闷死, 随机用同样方法扫入 3—4 只残翅雄蝇,塞紧棉塞,贴好标签,保持水平直至果蝇苏醒后放 入 25 ℃恒温培养箱中培养。 反交组合:将亲本性别交换。 (3 )培养 7 天之后把亲本果蝇成虫全部倒出来处死。 (4 )再过 7 天 F1 成蝇出现,把 F1 成蝇转移到经过消毒的空瓶子里进行适度麻醉,观察 F1 翅形的变化,并把结果

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