人教版高中生物课堂笔记生物选修3.pdfVIP

生物选修三知识点 专题 1 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望， 进行严格的设计， 通过 体外 DNA 重组和转基因技术， 赋予生物以 新的遗传特性 ，创造出 更符合人们需要的新的生物类型和生物产品 。基因工程 是在 DNA 分子水平 上进行设计和施工的，又叫做 DNA 重组技术 。 〔一〕基因工程的根本工具 1. “分子手术刀〞—— 限制性核酸内切酶〔限制酶〕 〔1 〕来源：主要是从 原核生物 中别离纯化出来的。 〔2 〕功能： 能够识别双链 DNA 分子的某种 特定 的核苷酸序列， 并且使每一条链中 特定 部 位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 断开，因此具有 专一 性。 〔3 〕结果：经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式： 黏性末端 和平末端 。 2. “分子缝合针〞—— DNA 连接酶 (1) 两种 DNA 连接酶〔 E coliDNA· 连接酶和 T4- DNA 连接酶〕的比拟： ①相同点：都缝合 磷酸二酯 键。 ②区别： E coliDNA· 连接酶来源于 T 4 噬菌体 ，只能将双链 DNA 片段互补的 黏性末端 之间 的磷酸二酯键连接起来；而 T4 DNA 连接酶能缝合 两种末端 ，但连接平末端的之 间的效率较 低。 (2) 与 DNA 聚合酶作用的异同 :DNA 聚合酶只能将 单个核苷酸 加到已有的核苷酸片段的末 端，形成磷酸二酯键。 DNA 连接酶是连接 两个 DNA 片段 的末端，形成磷酸二酯键。 3. “分子运输车〞—— 载体 〔1 〕载体具备的条件：① 能在受体细胞中复制并稳定保存 。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA 片段插入 。 ③具有标记基因，供重组 DNA 的鉴定和选择 。 〔2 〕最常用的载体是 质粒 ,它是一种 裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具 有自我复制能力的双链环状 DNA 分子 。 〔3 〕其它载体： 噬菌体的衍生物、动植物病毒 (二)基因工程的根本操作程序 第一步： 目的基因的获取 供学习参考 1. 目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因 。 2. 原核基因采取 直接别离 获得，真核基因是 人工合成 。人工合成目的基因的常用方法有 反 转录法 _和化学合成法 _。 3.PCR 技术扩增目的基因 〔1 〕原理： DNA 双链复制 〔2 〕过程：第一步：加热至 90 ～95 ℃DNA 解链 ；第二步：冷却到 55 ～60 ℃， 引物结 合到互补 DNA 链；第三步： 加热至 70 ～75 ℃，热稳定 DNA 聚合酶从引物起始互补链的 合成 。 第二步： 基因表达载体的构建 1. 目的：使目的基因在受体细胞中 稳定存在 ，并且可以 遗传至下一代 ，使目的基因能够 表 达和发挥作用 。 2. 组成： 目的基因 ＋启动子 ＋终止子 ＋标记基因 〔1 〕启动子：是一段有特殊结构的 DNA 片段 ，位于基因的 首端 ，是 RNA 聚合酶 识别和 结合的部位，能驱动基因 转录出 mRNA ，最终获得所需的 蛋白质 。 〔2 〕终止子：也是一段有特殊结构的 DNA 片段 ，位于基