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一、放射免疫分析(RIA) 原理 放射性标记抗原与非标记抗原(包括标准抗原或待测抗原)与有限量的特异性抗体发生可逆性竞争结合。 Ag + Ab Ag Ab + Ag + Ag* Ag*+Ag*Ab * RIA的基本步骤 1. 加样 2. 孵育 3. 分离结合和游离部分 4. 测放射性 5. 数据处理 基本试剂 (一)特异性结合剂 特异性结合剂包括抗体、血浆结合球蛋白和受体 * 1. 抗体 抗体的制备是用适宜的纯化的免疫原在动物身上人工免疫，分子量5000的蛋白多肽类物质具有较好的免疫原性。 抗血清质量鉴定的检测指标是滴度、亲和力和特异性。 抗体应具备三个条件：高亲和力、高特异性和高滴度。 2. 标记抗原 高比活度和高放化纯度是保证分析灵敏度的前提； 半衰期不能太短，以保证整个分析过程的完成； 不改变原有抗原的特性。 * 复合物和游离抗原的分离 抗原抗体在液相环境中反应： 1) 双抗法 2) 聚乙二醇法 3) 葡萄球菌蛋白沉淀法 4) 活性炭吸附法 5) 微孔滤膜法 * 1) 吸附牢固而且抗体量足够； 2) 不影响抗体的免疫活性； 3) 非特异性结合低； 4) 吸附材料理化性质稳定； 5) 吸附材料价廉易得。 抗体吸附于固体支持物上： * 方法包括： 1.