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;考点1、氨基酸的分类的知识要点:
1、根据R基团极性不同,氨基酸可分为:
(1)非极性氨基酸(9种):甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、亮氨酸(Leu)、异亮氨酸(Ile)、缬氨酸 (Val)、脯氨酸(Pro)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)、甲硫氨酸(Met);
(2)极性不带电荷氨基酸(6种)丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、半胱氨酸(Cys)、酪氨酸(Tyr)、天冬酰胺(Asn)、谷氨酰胺(Gln);
(3)极性带负电荷氨基酸(2种):天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu);
(4)极性带正电荷氨基酸(3种):赖氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)、组氨酸(His)。
2、根据R的化学结构
(1)脂肪族氨基酸:1)疏水性:Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Met、Cys;2)极性:Arg、Lys、Asp、Glu、Asn、Gln、Ser、Thr
(2)芳香族氨基酸:Phe、Tyr
(3)杂环氨基酸:Trp、His
(4)杂环亚氨基酸:Pro
3、必需氨基酸和非必需氨基酸:
必需氨基酸包括亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、色氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸等8种。精氨酸和组氨酸为半必需氨基酸。
;考点1、氨基酸的分类;考点2、氨基酸的两性解离和等电点;考点2、氨基酸的两性解离和等电点;考点2、氨基酸的两性解离和等电点;考点2、氨基酸的两性解离和等电点;考点3、蛋白质的结构;考点3、蛋白质的结构;考点3、蛋白质的结构;考点3、蛋白质的结构;考点3、蛋白质的结构;4、(07年全国联赛)大多数蛋白质易溶于水。基于这一点,你认为像亮氨酸
这样的疏水氨基酸最有可能存在于天然蛋白质的哪个部位 ( )
A.内部 B.表面 C.肽链的末端 D.完全随机存在
5.下列关于蛋白质分子三级结构的描述中,错误的是 ( )
A.天然球蛋白分子均有三级结构
B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性
C.三级结构的稳定性主要由次级键维系
D.亲水基团分布在三级结构的表面
E.直接决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基
6.关于蛋白质结构的叙述,哪项不恰当 ( )
A、胰岛素分子是由两条肽链构成,所以它是多亚基蛋白,具有四级结构
B、蛋白质基本结构(一级结构)中本身包含有高级结构的信息,所以在
生物体系中,它具有特定的三维结构
C、非级性氨基酸侧链的疏水性基团,避开水相,相互聚集的倾向,对多
肽链在二级结构基础上按一定方式进一步折叠起着重要作用
D、亚基间的空间排布是四级结构的内容,亚基间是非共价缔合的
;考点4、蛋白质的盐溶、盐析、变性和复性;考点4、蛋白质的盐溶、盐析、变性和复性;考点4、蛋白质的盐溶、盐析、变性和复性;考点4、蛋白质的盐溶、盐析、变性和复性;考点5、蛋白质的分离提纯技术 ;考点5、蛋白质的分离提纯技术 ;考点5、蛋白质的分离提纯技术 ;(1)凝胶过滤层析:又称分子筛层析。这是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。凝胶过滤是一种柱层析,柱中的填充物是大分子的惰性聚合物,最常用的有葡聚糖凝胶(商品名为Sephadex)和琼脂糖凝胶(商品名为.Sepharose)等。葡聚糖凝胶是具有不同交联度的网状结构物,它的“网孔”大小可以通过控制交联剂与葡聚糖的比例来达到。不同型号的葡聚糖凝胶装在层析柱中,不同分子的蛋白质混合物借助重力通过层析柱时,比“网孔”大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒的网格内,而被排阻在凝胶粒之外,随着洗脱剂通过凝胶粒外围而流出;比“网孔”小的分子则扩散进入凝胶粒内部,然后再可逆地扩散出来通过下层凝胶。这样,由于不同大小的分子所经路程不同而得以分离,大分子先洗下来,小分子后洗下来。
; (2)离子交换层析:根据其带电荷的不同达到分离的目的。常用于蛋白质分离的离子交换剂有弱酸性的羧甲基纤维素(carboxymethyl-cellulose, 简称CM一纤维素)和弱碱性的二已基氨基已基纤维素(diethyl-amino-ethyl-cellulose,简称DEAE一纤维素),前者为阳离子交换剂,后者为阴离子交换剂。
离子交换层析原理及简单流程: 离子交换剂的结合力取决于彼此间相反电荷的静电吸引,这与溶液的pH值有关,因为溶液的PH值决定离子交换剂与蛋白质的电离程度。盐类的存在可以降低离子交换剂的离子和蛋白质的相反电荷基团之间的静电吸引。因此,蛋白质混合物的分离可用改变溶液中盐类离子强度和PH值来完成。对离子交换剂结合力最小的蛋白质首先由层析柱中洗脱出来。
;(3)亲和层析 :是分离蛋白质
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