空气中微生物的检测.pptVIP

* 文章如果有不当或者不妥的地方，请您联系我修改文章或者删除文章，文章来源于网络收集，如果有侵权的问题，请联系我沟通协调改正，非常感谢您！ 空气中微生物的检测 一、试验目 二、试验原理 三、试验步骤 四、结果计算 五、结果评价 一、试验目和意义 掌握检测和计数空气中微生物基础方法 掌握无菌操作技术和微生物试验基础操作 学习对室内空气进行初步微生物学评价 试验意义 空气中细菌总数常作为室内空气质量和空气受到微生物性污染程度指标。 用于医院、公共场所等空气质量评价 二、试验原理 1: 自然沉降法（沉降平板法） 依据空气中携有微生物气溶胶粒子在地心引力作用下, 以垂直自然方法沉降到琼脂培养基上, 经过24h, 37℃温箱培养计算出菌落数。 特点: 此法简单方便, 但稳定性差, 直径1～5μm粒子在5min中内沉降距离有限, 使小粒子采集率较低。 2.撞击法 Anderson采样器原理: 多级筛孔型采样器 由6个带有微细针孔金属撞击盘组成, 盘下放置有培养基平皿, 每个圆盘上有400个环形排列小孔, 由上到下孔径逐步减小。气流从顶罩进第一级, 较小粒子会因为动量不足随气流绕过平皿进入下一级。经过6次撞击后, 可把绝大部分微生物采下。 Anderson采样器（FA-1型） 各级撞击盘捕捉粒子范围及孔径大小 Ⅰ: ＞7μm 孔径1.18㎜ Ⅱ: 4.7~7μm 孔径0.91㎜ Ⅲ: 3.3~4.7μm 孔径0.71㎜ Ⅳ: 2.1~3.3μm 孔径0.53㎜ Ⅴ: 1.1~2.1μm 孔径0.34㎜ Ⅵ: 0.65~1.1μm 孔径0.25㎜ 多种粒径大小菌落易沉降部位及意义 特点 a. 采集粒谱范围广, 通常在0.2～20μm以上; b. 采样效率高, 逃逸少 c. 微生物存活率高 3.滤过法: 使一定量空气经过吸附剂（灭菌生理盐水）, 然后培养吸附剂中细菌, 计算出菌落数。 4.液体撞击法: 和固体撞击式采样器一样, 是利用喷射气流方法将空气中微生物粒子采集在小体积液体中, 适适用于高浓度空气微生物采样。 三、试验步骤 1.自然沉降法 配制琼脂培养基（已做） ↓ 培养皿暴露空气中5min/10min ↓ 37℃温箱培养24h ↓ 计数和结果评价 采样布点标准 a. 依据室内面积进行对角线或者梅花式均匀布点, 小于50m2房间应设3个点, 50～100m2设3～5个; 100m2以上最少5个点 b. 采样高度 和人呼吸高度一致（1.2～1.5m） c. 采样点应避开风口, 离墙壁距离应大于0.5m,采样时关闭门窗, 降低人员走动 2.撞击法 调整采样器高度为呼吸带高度于1.2～1.5m ↓ 将平皿依次放入圆盘, 固定并做好标识 ↓ 接通电源, 开打电源开关, 调整流量到28.3L/min ↓ 采样5min/10min后, 取出平皿, 经过24h, 37℃培养, 计数 分组: 4个同学一组, 分别采取自然沉降法和Anderson采样器, 采样时间设为5min和10min, 比较两种采样方法结果。 注意事项: 整个过程注意无菌操作。 四、结果计算 1.自然沉降法 依据奥梅梁斯基提议, 面积为100cm2平板培养基, 暴露于空气中5min, 于37℃温箱培养24h后所生长菌落数相当于10L空气中细菌数 空气中细菌数（cfu/m 3） =1000×[(100/A) ×(5/t) ×(1/10)] ×N = 50000N/(A×T) A-平板面积（cm2） T-暴露时间（min） N-平均菌落数（cfu/皿） 2.撞击法 空气含菌量(cfu/m3)=[六级采样板总菌数（cfu）÷28.3（L/min）×采样时间（min）] ×1000 计算空气中微生物大小分布: 各级微生物粒子数％=该级菌落数/六级总菌落数 * 文章如果有不当或者不妥的地方，请您联系我修改文章或者删除文章，文章来源于网络收集，如果有侵权的问题，请联系我沟通协调改正，非常感谢您！