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疫苗制造基本程序;项目一 细菌性灭活疫苗制造 项目二 细菌性活疫苗制造 项目三 病毒疫苗制造;项目一;灭活细菌疫苗通用制造程序;;基础步骤;一、细菌性灭活疫苗制造;（二）菌液培养 ;（三）灭 活 ;（四）浓 缩 ; ;项目二;弱毒菌种多系冻干品, 由中国药品生物制品检定所或中国兽药监察所传代、判定、保留与分发, 少数由国家指定单位判定、保留与供给。 菌种使用前应按规程要求进行复壮、挑选, 并作形态、特征、抗原性和免疫原性判定, 符合标准后方可用于制苗。 将检定合??菌种接种子于要求培养基, 按要求条件增殖培养, 经纯粹检验及相关检验合格者即可作为种子液。 种子液通常在0～4?C可保留2个月, 在保留期内可作为菌苗生产批量种子使用。 ;按1%～3%量将种子液接种于培养基, 然后依不一样菌苗要求进行培养。 如猪丹毒弱毒菌须在在深层通气培养中加入合适植物油作消泡剂, 通入过滤除菌热空气进行培养制造菌液 如人用炭疽活疫苗、卡介苗经固体表面培养完成后须按要求要求将菌苔洗下制成菌液 菌液于0～4?C暗处保留, 待抽样经纯粹、活菌数等检验合格后使用。; 经检验合格菌液, 按要求百分比加入保护剂配苗, 充足摇匀后随即进行分装, 分装量必需正确。 分装好菌苗快速送入冻干柜进行预冻、真空干燥, 冻于完成后立刻加塞、抽闲、封口, 移入冷库保留, 并由质检部门抽样检验。 ;步骤图1——细菌疫苗制造工艺步骤;项目三;一、病毒性禽胚培养疫苗制造 ;（二）种毒与毒种继代 ;（三）接毒与收获 ; 鸡胚接毒后培养增殖时间和温度、湿度以及收获标准与内容物依不一样病毒和不一样疫苗而异。 如鸡新城疫I系疫苗, 接毒后于38.5~39?C、相对湿度60%~70%条件培养增殖, 搜集接毒后24~48h内死亡胚, 置0~10?C冷却4~24h, 收获胚液, 进行无菌检验, 供制备湿苗用。 也可收获胚液、胎儿及绒毛尿囊膜混合制成乳剂制备冻干苗。 鸭瘟鸡胚化弱毒疫苗, 则搜集接毒后48~120h内死亡鸡胚, 冷却后采取绒毛尿囊膜、尿囊液、胎儿制造冻干苗用。 ; 按要求收获胚液、胎儿和绒毛尿囊膜乳剂经无菌检验合格后即可进行配苗。 1.湿苗 通常于鸡胚液内, 按每毫升加入青霉素和链霉素500~1000U, 放置0~10?C 冷暗四处理后分装。 2.冻干苗 经无菌检验后合格胚液或胚液、胎儿、绒毛尿囊膜乳剂, 按百分比加入保护剂, 充足混合后滤过, 于滤液内按每毫升加入青、链霉素500~1000U, 混合后分装冻干。 3.灭活苗 收获鸡胚液经无菌检验及毒价测定合格后, 按要求百分比加入平衡液, 按不一样病毒灭活温度、时间进行灭活, 加入对应佐剂, 制备成灭活疫苗, 放置4-10?C保留。;步骤图2——病毒性禽胚疫苗制造工艺步骤;二、病毒性细胞培养疫苗制造; 制造疫苗用细胞大致为原代细胞和传代细胞两类, 依据病毒种类、疫苗性质与工艺步骤选择不一样细胞。 选择依据包含: 病毒适应性高、毒价高、细胞起源方便、制备简单、生命力强。 如猪瘟兔化弱毒牛睾丸细胞疫苗采取犊牛睾丸原代细胞; 脊髓灰质炎活疫苗选择vero细胞; 狂犬病弱毒细胞适应疫苗采取BHK21细胞增殖病毒等。;（四）接毒与收获 ;（五）配 苗 ;步骤图3——病毒性细胞疫苗制造工艺步骤;;三、病毒性动物组织疫苗制造 ; 种毒既可用抗原性优良、致死力强自然毒株脏器组织毒或强毒株增殖培养物, 也可用弱毒株组织毒种。不管何种种毒都须经纯粹、抗原性和免疫原性检验合格后使用。 接种路径依病毒性质和目而异, 比如猪瘟结晶紫苗, 采取猪肌肉注射血液毒种; 牛瘟兔化弱毒疫苗, 以兔耳静脉注射脾淋毒种; 狂犬病疫苗, 用兔脑毒种接种绵羊脑内路径感染。 多个动物常见接种路径以下: 1. 脑内注射: 颅前后中线5mm平行线与瞳孔横线交叉处。 2. 静脉注射: 家兔由耳静脉注入; 鸡自翅下肢静脉注入。 3. 肌肉注射: 选择腿部、胸部、臀部等肌肉丰满处注射。 4. 皮下注射: 家兔和豚鼠可选择在腹部或后腿内注射。 5. 腹腔注射: 家兔与豚鼠可选腹股沟处刺入腹腔。 ; 动物在接种感染后应天天观察和检验要求各项指标, 指标或项目因不一样病毒而异。常规观察、检验项目如食欲、精神和活动状态、体温、粪便、尿和血液改变等。 依据观察征象和