分子克隆的工具酶.pptVIP

第一百二十七页，共181页 PvuII BamHI BclI BglII XhoII MboI Sau3AI 识别位点中含GATC序列 ClaI(1/4) XbaI (1/16) TaqI (1/16) MboII (1/16) HphI(1/16) 部分识别序列含GATC序列 4个ClaI位点(ATCGATN)中有一个该序列 第九十五页，共181页 有些限制酶对Dam甲基化敏感 不能切割相应的序列 BclI, ClaI, MboI, XbaI 等 不敏感的有 BamHI, Sau3AI, BglII, PvuI等 第九十六页，共181页 一般哺乳动物DNA 不会在A-N6上甲基化 当需要在敏感位点上完全切割DNA时，必须从dam- E.coli中提取DNA 第九十七页，共181页 2. Dcm甲基化酶 识别CCAGG或CCTGG序列 在第二个C上C5位置上引入甲基 第九十八页，共181页 EcoRII / BstNI CCA(T)GG 二者识别序列相同，但切点不同 EcoRII受dcm甲基化作用影响 BstNI可避免这一影响 第九十九页，共181页 受影响酶有： Acc65I GGTACC AlwNI ApaI GGGCCC EcoRII