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植物内生菌分离处理方法总结计划 植物内生菌分离处理方法总结计划 PAGE PAGE / NUMPAGESPAGE18 植物内生菌分离处理方法总结计划 PAGE 植物内生菌分别办理方法 文件 资料 前办理 刘明志， 南方红豆杉 截成2～3cm长的 2011 的老树皮、幼 小段，去除树皮层 茎、叶  第一次消毒 第二次消毒（含三 消） 75%酒精中浸泡 30 0．1%升汞溶液浸泡 s 8min，无菌水冲刷 3～5次  办理 比较 研磨成匀浆液，倾 倒于PDA上  培育基 切成0．5cm左右的 块，接种于有 100mgL 1青霉素和链霉素的 PDA 固体培育基表 面。每皿 10块 刘金花 黄花蒿的根， 叶切成1cm2,茎和 2011 茎，叶 叶切成1cm左右小 段（两头皆有切口）  将根，茎，叶一次 用75%酒精浸 1min  1%的次氯酸钙溶液浸泡1min,用无菌水冲刷5次  置于含双抗的 VA 培育基平板培育  待切口处长出菌落伍 转至PDA培育基进行 内生真菌的分别 宋培勇 珙桐茎、叶和 将收集的新鲜珙桐 2011 叶柄 的茎、叶和叶柄分 别用流水冲刷 ,风 干表面水分 , 剪成 小块或小段, 无菌水漂洗 2 次 孙传伯 台湾7303毛 采回的样本用自来 2011 豆全株 水洗净,并用无菌 纸吸干水分 , 并用 无菌纸吸干水分 ,切 取支根 110cm长的 小段, 须根切成 115cm的小块  75%酒精浸泡1min 用75%酒精浸泡5min、7min、10m in  再用 2% NaClO 溶液中浸泡 3min, 转入 75%酒 精中浸泡30s,接着用无菌水漂洗 次, 分别用0.1%升汞溶液办理4min、6min、8min进行表 面灭菌,此试验分别重复3次。最后用无菌水冲刷4次,。最后用无菌水冲刷 次  取最后一次漂洗液涂布 平放于NA 平板上, NA平板作为比较 28°C培育 2-3d 将组织块在研钵 最后一次冲刷液涂 3种 取上清匀浆涂抹于 3 中充足研磨成匀 不一样培育基平板,26~28e 种不一样培育基上, 取 浆 下培育2~3d,挑选出最 匀浆涂布于不一样培育 佳消毒时间和培育基 ,将 基平板,每浓度重复 表面消毒完全棉花根部 3次,而后将培育皿置 切块放入灭菌研钵顶用 于26~ 28e 恒温箱中 无菌水冲刷4次,取上清 培育2~ 3d, 察看培育 液涂抹于培育基上。以无 出的菌落形态 菌水冲刷为比较试验。 张鑫 植物圣罗勒 将叶子用流水冲刷 1% 的次 氯酸 0．02mol/L、pH 加无菌水将资料 2011 的健康 10min 钠 中浸 泡10 7．0的无菌磷酸 研磨 叶子 min 钾缓冲液(PB)漂 洗 4次 李铭, 石耳目地衣 2011  涂布培育 为了引诱产孢，黑化菌 株在光照/黑暗(12h∶ 12h)条件下，于2%的 PDA 培育基上，18℃下培 养3个月 刘杰凤 健康的小白 流水冲刷洁净，剪 75％酒精中浸泡 310％次氯酸钠浸泡 无菌条件下用适 以最后一次的漂洗液作 搅拌后静置3min，取 2011 菜，得病的小 成小段 min 茎为8min，根和叶 量的 比较 上清液0．5mL分别 白菜根，茎， 因为气孔较茎大， PBS ，30℃ 涂布于分别培育基平 叶 浸泡5min即可，然 缓冲液捣碎 下培育 板上，每种资料做3 后用无菌水浸泡多 一个礼拜 次平行 次，每次3min 朱士茂 2011 肖淑贤 2011. 王剑峰 2011  新收集的银 在自来水中冲刷干 （一），根的表面 杏枝条，叶子 净，而后将枝条和 灭菌:0.1%的土温 和根 根截成3－4cm 20消毒1min，无 长，将叶子和叶柄 菌蒸馏水冲刷2 分开，分别将根， 次。 枝，叶放在不一样的 （二）枝，叶和叶 灭菌后的广口瓶中 柄： 75%的乙醇 消毒 30s，无菌蒸 馏冲刷3次 长势好、无病 在自来水中冲刷干 采纳升汞、乙醇、 害的植株 净 H2O2、次氯酸钠等 表面消毒剂进行消 毒，无菌水冲刷 取生长15 无表面灭菌方法 天马铃薯  (一）,根：75%的乙 醇消毒30s，无菌蒸 馏水冲刷 2次，0. 1% 升 汞 消 毒 5min，无菌蒸馏水 冲刷 5次。 (二）枝，叶和叶柄： 1%升汞消毒 7min，无菌蒸馏水冲刷5次  茎，将其表皮剥离，用无菌小刀纵切表皮取此中间的部分，而后将其切成0.5cm×0. 5cm大小 叶和叶柄，用研钵将叶磨碎(内放石英砂和生理盐 水)而后用无菌移液管汲取0. 2ml放入培育皿中 直接切取植物组织或榨取植物组 织汁液稀释  ①将以上接入的每种平 皿按相同的方法接入 5min 后用无菌镊子取 出;②用无菌蒸馏水冲刷 已表面灭菌后的资料，而后将此液体移入培育基 中，培育察看。  K