核酸的分离提取.pptVIP

核酸的分离提取;关键内容;（美）Dveksler GS and Dieffenbach CW. 黄培堂 俞炜源 陈添弥等译 现代生物技术译从 PCR技术试验指南 科学出版社 （英） Clark MS 主编 顾红雅 瞿礼佳 主译 植物分子生物学试验手册 高等教育出版社 施普林格出版社 郑成木 主编 植物分子标识原理与方法 湖南科学技术出版社 Brown TA. 魏群等译 国外优异生命科学教材译从 基因克隆和DNA分析 高等教育出版社;第一部分: 核酸分离制备;第一部分: 核酸分离制备;2. 提取DNA应满足基础标准;(1) 破坏（消化）细胞壁、释放内容物 在破壁时也会剪切DNA, 在完整性和产量间折衷考虑 分离总DNA破壁方法 液氮中快速冷冻、研磨成细粉末 分离核DNA或细胞器DNA破壁方法 更温和方法、以免过早破坏内膜系统、含渗透剂缓冲液4oC匀浆 (2) 破坏细胞膜使DNA释放到提取缓冲液中 通常靠SDS或CTAB去污剂来完成, 保护DNA受核酸内源酶降解 缓冲液通常含EDTA, 可螯合大多数核酸酶所需要辅助因子-镁离子;（1）植物材料采集及前处理 尽可能使组织材料保持水分而保鲜（用湿纱布包裹,放置于密闭冰盒等）