QuEChERS萃取方法简要介绍 .docxVIP

PAGE PAGE 1 QuEChERS萃取方法简要介绍 QuEChERS(发音同catchers)是Quick，Easy，Cheap，Effective，Rugged，Safty的缩写，即为：“迅速、简易、便宜、有效、稳定、平安”的萃取办法。该办法是Anastassiades等于2002年在首先在EPRW会议提出，并于2003年正式发表的一个用于农产品中多农药残留物分析的前处理办法。Anastassiades等最初旨在针对水果、蔬菜、谷物等低脂农产品而建立一个迅速、低花费的多农药残留物样品前处理办法。d-SPE在该办法中被应用于除去样品中的杂质干扰物。该办法已经得到AOAC和欧盟农残监测委员会的认可，并且在食品平安检测试验室得到广泛的用法。目前，一些厂商可以提供QuEChERS萃取的试剂包，例如，艾杰尔、西格玛、Restek、UCT等公司。QuEChERS详细办法如下： 第一步：粉碎样品取10～15 g样品切成大约3 cm×3 cm大小的块状，然后放入-18℃的冷藏柜中冷冻过夜。在低温下对样品举行匀浆。因为样品的用量惟独10～15 g，必需注重样品的代表性。因此，正确采样非常关键。为了确保样品的代表性，采样量不应少于1 kg。样品必需充分地混合匀称，然后取10～15 g举行检测。为了削减挥发性农药残留物的损失，建议在匀浆过程中加入干冰。假如样品含水量在25％～80％之间，要加入一定量的水使得样品中水的含量达到10 g(以10 g样品为例)。假如样品含水量小于25％(例如，干果、面粉及蜂蜜)，应当适当削减样品的用量，并加入一定量的水。注重，加人的水的温度应当在4℃左右，以中和加盐所产生的热量。虽然丙酮和乙酸乙酯也可以作为萃取溶剂，但试验表白乙腈最适合。由于在加入盐后，乙腈比丙酮越发简单与水相分层。乙酸乙酯虽然比乙腈简单与水分层，但是乙酸乙酯的共萃取物较多，另外对酸l生农药的萃取回收率偏低，而且在下一步簇拥固相萃取时得到的溶液没有乙腈整洁。盐的加入有利于有机相与水相的分层。同时，盐析效应有利于目标化合物更多地分配在有机相中。为了促使有机相与水相分层，需要加入过饱和的硫酸镁。而氯化钠的加入则有利于控制萃取溶剂的极性以削减共萃取物的含量。氯化钠的用量必需注重，过多的氯化钠会影响有机溶剂对极性目标化合物的萃取。大多数农药在酸性条件下较为稳定。对于大多数样品而言，柠檬酸缓冲盐的加入使得样品溶液的pH在5～5.5之间。该pH范围既有利于农药残留物的定量萃取，又可以防止酸性或碱性不稳定农药残留物的损失。假如样品本身是富酸性的(pH 3)，可以视其酸度适当加入5 mol／L氢氧化钠。例如，柠檬、酸橙和葡萄加入600μL，树莓加入200μL。为了防止硫酸镁遇水结块，在加入盐后立刻强烈振荡数秒。注重，因为含有酸基的农药(例如：phnoxyalcaraoic acids)会与PSA结合，假如要检测的样品中具有这类化合物，就不能举行接下来的PSA簇拥固相萃取净化。而是挺直举行LDMS／MS分析。第三步：簇拥固相萃取在一次性的聚乙烯离心试管中按每毫升萃取液加入25 mg PSA吸附剂和150 mg硫酸镁的比例加入适量的PSA和硫酸镁，然后将一定量的有机萃取液转移至试管中。强烈振荡30 s，3000 r／rnin离心5 min。将清液转移至带盖样品瓶中，并快速用5％(体积分数)乙酸(用量为10μL／mL清液)将pH调整至5左右。因为在其次步萃取／分别的到的萃取物中含有脂肪和蜡状物等共萃取物，这些物质会对GC分析的稳定性产生负面的影响，因此必需除去，QuEChERS采纳的是d-SPE除去杂质。加入簇拥的固相萃取吸附剂的目的是要吸附萃取液中的杂质，而不是目标化合物。PSA可以吸附极性有机酸及一些糖和脂类杂质。假如脂肪类物质较多，可以先将萃取物放在低温下约1 h，使脂肪凝固并除去。残留的共萃取物可以通过上述：PSA+硫酸镁d-SPE除去。也可以在用PSA举行d-SPE的同时加入一定量的C18或C8以更有效地除去脂肪。添加量分离是每mL萃取液25及50 mg。对于胡萝卜素或叶绿素含量高的样品，在举行簇拥固相萃取时，除了PSA外，还可以加入一定量的GCB，并将振荡时光延伸至2 min。注重，因为GCB对具有平面结构的农药具有很强的亲和力，GCB的用量一定要适当控制。按照Anastassiades等的试验，只要肉眼还能够观看到萃取液中的色素，GCB的用量就不会导致这些农药显然的损失。例如，对于胡萝卜、莴笋等，GCB的用量在2.5 mg；而对于甜青椒、菠菜等则可加入7.5 mg GCB 。在萃取液中加入适量的乙酸可以对一些农药起到稳定作用，另外也可以充实一些农药在GC色谱柱中的拖尾现象。通过QuEChERS萃取办法对25