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超临界二氧化碳萃取工艺对蛇床子素提取率的影响研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：超临界二氧化碳萃取工艺对蛇床子素提取率的影响研究 1 1 材料与仪器 2 2 实验过程 2 3 实验设计方案 4 4 结果与讨论 5 文2：乌药超临界二氧化碳萃取工艺的研究 8 1 仪器与材料 9 2 方法与结果 9 3 讨论 10 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 超临界二氧化碳萃取工艺对蛇床子素提取率的影响研究 文1：超临界二氧化碳萃取工艺对蛇床子素提取率的影响研究 蛇床子系伞形科蛇床属植物蛇床Cnidium monnieri(L.) Cuss.的干燥成熟果实。中药蛇床子的化学成分比较复杂，除挥发油外，主要为蛇床子总香豆素（Total coumari of Fructus Cnidii ,TCFC）。TCFC主要以蛇床子素（osthol）和欧前胡素（inperatorin）为主，目前已知的蛇床子提取物的化学成分可达40多种。蛇床子味辛苦，性温，具有散寒、祛风、杀虫等功能。用于湿痹腰痛、阴痒带下等。有关蛇床子的超临界CO2萃取工艺，日本学者宫地洋［1］对 台湾 产蛇床子进行过初步研究，以 中国 大陆部分产地的蛇床子为研究对象，广州市医药 工业 研究所的葛发欢等对其挥发性成分［2］和有效成分的萃取［3］进行过初探，山西省中医研究院的王永辉等［4］进行了萃取压力、萃取时间及CO2流量三因素对蛇床子素含量影响的研究。然而，影响超临界CO2萃取的工艺参数较多，且工艺参数间往往存在交互作用，为此，本文针对超临界CO2萃取全过程采用二次回归连贯设计法对五因素及其交互作用进行研究，确定了各因素及其交互作用对蛇床子素提取率的影响规律，从而得出回归方程，由此得出最佳工艺参数。 1 材料与仪器 材料：蛇床子购自江苏省姜堰市药材公司，经山西省中医学院中药鉴定室裴香萍、牛燕珍老师鉴定系伞形科蛇床属植物蛇床Cnidium monnieri(L.) Cuss的干燥成熟果实。将蛇床子粉碎至120目备用。CO2：太原天计应用化工有限公司生产，食品级，纯度在99%以上。蛇床子素的标准品购于中国药品生物制品检定所。实验装置：HAC型超临界萃取装置（采用一萃二分流程），由江苏省南通华安超临界萃取有限公司制造。DF20型流水式中药粉碎机，由无锡中银机械制造有限公司制造。LC5500型高效液相色谱仪，UV检测器, 由北京市东西 电子 科技研究所制造。型超声波清洗器，由美国Metter Electronics公司制造。 2 实验过程 超临界CO2萃取基本流程如下：CO2瓶→制冷系统→高压泵→萃取釜→分离釜Ⅰ→分离釜Ⅱ→（循环）。实验过程：称取120目蛇床子粉末200 g放入萃取釜中，对萃取釜、分离釜Ⅰ、分离釜Ⅱ、贮罐分别进行加热或冷却，当达到所选定的温度时开启CO2瓶，通过高压泵对系统进行加压，当系统压力达到所设定的压力时，开始循环萃取，保持恒温恒压，按照 计算 机设定的取料时间间隔为每10 min取1次料，从分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ出料口中取料。 蛇床子素含量的测定 色谱分离条件色谱柱为ODS（十八烷基硅烷）柱；流动相为甲醇水（8∶2）；流速为1 ml/min；检测波长为322 nm;柱温为35℃，进样量20 μl。在上述色谱分离条件下，用外标法测定蛇床子素的含量，其HPLC谱图见图1。 图1 蛇床子素高效液相色谱图（略） 线性关系考察 蛇床子素对照品采用归一化法对其纯度进行测定，结果为98%。精密称取蛇床子素对照品 2 g，用95%乙醇溶解并定容至100 ml，得 mg/ml的蛇床子素对照品溶液。分别量取上述蛇床子素对照品溶液，，，，， ml置于6个25 ml容量瓶中，用95%乙醇稀释至刻度，待测。根据浓度(X)-峰面积（Y）进行线性回归，回归方程：Y=2 +×107X，r= 86 ，线性范围~ μg。 方法精密度实验精密称取蛇床子提取物5份，按本实验方法分别测定蛇床子素的含量，D为%，表明方法精密度良好。 加标回收率实验精密称取已知含量的蛇床子提取物样品，分别加入一定量的蛇床子素标准品，按本实验方法进行测定。结果：回收率为%~% 样品测定样品的前处理：用第1溶剂（石油醚：醋酸乙酯=85∶15）100 ml润柱（柱子为100 ml酸式滴定管，硅胶为粗孔80～100目），取 g蛇床子超临界CO2提取物，用5 ml醋酸乙酯溶解后，倒入润洗好的柱子内，再用第1溶剂120 ml润洗，最后用100 ml95%乙醇洗脱，收集样品，将溶剂挥干后待测。样品的测定：精密称取经过处理的蛇床子超临界CO2提取物 g至25 ml容量瓶中，用95%乙醇