黄藤素片微生物检验方法验证中加菌方法的比较研究.docVIP

黄藤素片微生物检验方法验证中加菌方法的比较研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：黄藤素片微生物检验方法验证中加菌方法的比较研究 1 1 材料和方法 2 2 结果 4 3 讨论 5 文2：氨金黄敏颗粒微生物限度检查方法的验证 5 1材料与仪器 6 2验证条件 6 3方法与结果 6 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 10 正文 黄藤素片微生物检验方法验证中加菌方法的比较研究 文1：黄藤素片微生物检验方法验证中加菌方法的比较研究 A study on the microbiology verifying test of Huangtengsu tablet with bacterial put in ［Abstract］ Objective:To compare the different recovery rates resulted from different methods in putting bacterial in microbiology verifying test of Huangtengsu tablet. Methods: The centrifugalization and membrane filtration were used to get rid of the components restraining bacterial from Huangtengsu tablet. Results: The recovery rate of the bacterial put into drug before centrifugalization was evidently different from that after the last washing of membance filtration. Conclusio: The result of putting bacterial into drug after membrane filtration may not illustrate some bacterial contaminated in production, traportation and garner. ［Key words］ Microbiology verifying test; Bacteriostasis function; The centrifugalization and membrane filtration 2005版《 中国 药典》在药品微生物限度检验方法项下增加了方法学验证的内容，特别对有抑菌作用的药品指出可采用离心沉淀集菌法、薄膜过滤法或联合使用这些方法消除抑菌作用，并要求阳性菌的加入方法是最后一次滤膜冲洗时。针对黄藤素片的抑菌情况，笔者采用离心薄膜过滤法消除其抑菌，并就其加入阳性对照菌的方法进行了比较，发现加入阳性对照菌的方法不同，所得到的回收率差异是非常显著的。 1 材料和方法 试验材料 样品 黄藤素片分别由玉溪维和制药有限公司（批号，样品1）、昆明制药有限公司（批号，样品2）、云南滇池制药有限公司（批号，样品3）提供。 稀释剂及培养基 无菌磷酸盐缓冲液（pH ）按药典配制，TTC营养琼脂培养基、营养肉汤培养基［1］均来源于北京三药科技开发公司。 阳性对照菌 大肠杆菌［CMCC（B）44102］、金黄色葡萄球菌［CMCC（B）26003］、枯草芽孢杆菌［CMCC(B)63501］、白色念珠菌［CMCC（F）98001］［1，2］，由中国药品生物制品检定所提供。 方法 供试品的制备 分别取样10 g，匀浆后加入无菌磷酸盐缓冲液（pH ）至100 mL，制成1∶10供试液备用［1］ 阳性菌液制备 取相应菌株的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物1白金耳，接种至营养肉汤培养基内，培养18～20 h后用无菌磷酸盐缓冲液（pH ）稀释至相应的浓度［1］，备用。 试验Ⅰ组 分别吸取1∶10约含50～100个/mL阳性菌的供试液10 mL，置无菌离心管中，经500 min离心5 min后，以无菌操作取上清液1 mL置无菌磷酸盐缓冲液（pH ）100 mL中，加入装有直径为50 mm、孔径为（±）μm的微孔滤膜的过滤器内，减压抽干后，用无菌磷酸盐缓冲液（pH ）冲洗滤膜3次，每次50～100 mL，取出滤膜，按上述操作分别进行5次，各置5皿，再注入约45 ℃的TTC营养琼脂培养基约15 mL，混匀，37 ℃培养48 h后计数。 试验Ⅱ组 分别吸取1∶10供试液10 mL置无菌离心管中，经500 min离心5 min后，以无菌操作取上