硫酸亚铁对溃疡性结肠炎模型大鼠氧化应激状态的影响.docVIP

硫酸亚铁对溃疡性结肠炎模型大鼠氧化应激状态的影响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：硫酸亚铁对溃疡性结肠炎模型大鼠氧化应激状态的影响 1 1 材料和方法 2 2 结 果 4 3 讨 论 6 文2：解酒利胆汤对酒精性脂肪肝大鼠肝氧化应激状态的影响 7 1 材料与方法 7 2 结果 8 3 结论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 11 正文 硫酸亚铁对溃疡性结肠炎模型大鼠氧化应激状态的影响 文1：硫酸亚铁对溃疡性结肠炎模型大鼠氧化应激状态的影响 溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是一种病因 不明的直肠和结肠慢性非特异性炎症，临床主要表现为反复发作的腹痛、腹泻及黏液脓血便，重症或病情持 续活动的患者可出现缺铁性贫血。临床观察发现，给予UC患者口服铁剂不能很好地被耐受，甚至会加重 胃肠道症状或促进疾病活动［1］。硫酸亚铁（ferrous sulfate，FeSO 4 ）是临床最为常用的铁剂之一，同时也是一种强氧化剂，可能会因产生自由基（oxygen-derived free radicals，OFR）而加重组织损伤［2］。本实验利用三 硝基苯磺酸（2，4，6- trinitrobenzene sulfonic acid，TN- BS）复制UC模型，观察FeSO4对UC模型大鼠氧化应激状态的影响，为临床 治疗 提供依据。 1 材料和方法 药物和试剂 TNBS购于Sigma公司，5%（W/V）水溶液，批号为P2297;FeSO4，上海黄浦制药有限责任公司生产，批号为050606，轻轻把FeSO4片研碎，称取一定量的粉末，加入蒸馏水配成100 mg · ml -1的混悬液备用;丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、考马斯亮兰蛋白 检测试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品，批号为。 动物 雄性SD大鼠60只，体质量200～220 g，由安徽医科大学实验动物中心提供，普通级。 仪器 756MC紫外分光光度计（上海精密 科学 仪器有限 公司），TGL-16H高速离心机（珠海黑马医学仪器有限公司），可控式硅恒温水浴锅（上海锦屏仪器仪表有限公司），QL-901漩涡混合器（江苏海门麒麟医用仪表厂）， 电子 分析天平（上海天平仪器厂），DIAX-900内切式组织匀浆机（德国Heidolph公司） 大鼠UC模型制备［3］ 健康大鼠60只，随机分为6组。留2组作正常对照组与FeSO 4 对照组，余4组均制备模型，禁食不禁水24 h后，腹腔注射3%戊巴比妥钠（1 ml·kg-1）使大鼠轻微麻醉后，将直径2 mm的乳胶管经肛门轻轻插入大鼠体内大约8 cm处，将TNBS（125 mg·kg -1）的50%乙醇溶液缓缓注入到大鼠肠腔内，提起大鼠尾部，倒置30 s，使造模剂充分渗入大鼠肠腔。 分组及给药 将正常大鼠随机分为正常对照组与FeSO4对照组，每组10只;将造模大鼠随机分为模型对照组，Fe-SO4给药高、中、低剂量组，每组10只。FeSO4对照组大鼠，按照100 mg · kg-1·d-1 灌胃FeSO4混悬液;Fe-SO4高、中、低剂量组大鼠，分别按照300 mg·kg-1·d-1 、100 mg ·kg-1· d-1、50 mg·kg-1· d -1灌胃FeSO4混悬液;正常对照组及模型对照组大鼠每天灌胃同体积生理盐水，各组大鼠均在造模后6 h开始给药，连续给药2周。 症状观察 每天对各组大鼠进行称重，观察体质量变化并记录;观察大鼠粪便形状，记录大鼠发生腹泻、血便的数量。 结肠黏膜组织损伤评分 各组大鼠给药2周后，3%戊巴比妥钠过量麻醉，腹主动脉取血2 ml，离心后置-80 ℃冰箱保存备用。将肛门以上10 cm肠段取出，沿肠系膜纵行切开，用冰生理盐水冲洗，并称量。将黏膜向上展开，观察黏膜损伤并按照Wallace和Keenan1990年的评分标准［4］进行评分:0分为无炎症和溃疡;1分为局部充血但无溃疡;2分为有溃疡但无充血;3分为有1处溃疡及炎症; 4分为有2处或2处以上溃疡及炎症;5分为溃疡延伸超过2 cm。同时取少量炎症肠组织，迅速放置液氮罐中备用。 病理组织切片观察 取肛门以上8 cm肠段卷起，置10%中性甲醛液中固定，石蜡包埋，行4μm厚连续切片，HE染色观察组织学变化。 生化指标测定 血清及结肠组织MDA、SOD均按照检测试剂盒说明书进行操作。 统计学处理 计量指标以 x-±s 表示，多组间比较行方差分析，各组间两两比较行LSD检验，采用软件进行统计分析。 2 结 果 一般状态及大便性状的变化 见表1。正常组与FeSO 4对照组大鼠活动如常，反应机警，毛发有光泽，