塞来昔布对体外宫颈癌细胞株Hela和Siha的抑制作用.docVIP

塞来昔布对体外宫颈癌细胞株Hela和Siha的抑制作用 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：塞来昔布对体外宫颈癌细胞株Hela和Siha的抑制作用 1 1 材料与方法 2 2 结果 3 3 讨论 4 文2：毛鸡骨草体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用 5 1 材料与仪器 6 2 方法 6 3 结果 7 4 讨论 8 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 11 正文 塞来昔布对体外宫颈癌细胞株Hela和Siha的抑制作用 文1：塞来昔布对体外宫颈癌细胞株Hela和Siha的抑制作用 Abstract Objective:To study the inhibitory effects of celecoxib,a selective cyclooxygenase-2 inhibitor,on two cervical carcinoma cell lines in :The effect of cell cycle and cell apoptotic rates were analyzed by flow cytometry (FCM).Results:By FACS,it was found that the cell cycles of Hela and Siha cells were blocked by celecoxib,with the increasing of concentration:the G0/G1 phase ratio of Siha /Hela were increased,the S phase ratio were inhibited and the G2～M phase ratio were not effected incubated with celecoxib（≥25μmol/L）for 72 hou,the proliferation indexes(PI)were reduced（Ｐ＜）,while the apoptotic rates were increased(P＜),we can find sub- G1 summit in FACS :Celecoxib inhibited the proliferation and induced the apoptosis of Siha and Hela cell lines in vitro. Key words Cervical cancer；Celecoxib；Flow cytometry 宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤，是癌症造成妇女死亡的第二位原因。近年来的研究表明，环氧化酶(COX)，尤其是COX-2，与多种上皮性肿瘤的发生、 发展 关系密切［１］，并发现COX抑制剂在抑制肿瘤的发生、发展过程中发挥一定作用，但有关环氧化酶及其抑制剂与宫颈癌发生、发展之间关系的研究较少，因此我们采用细胞培养技术及流式细胞术检测选择性COX-2抑制剂塞来昔布对人宫颈癌细胞株（Hela和Siha）增殖和凋亡的影响，为进一步探讨COX抑制剂抗肿瘤作用的机制及其临床应用积累资料。 1 材料与方法 材料 人宫颈癌细胞株Hela及Siha购自第四军医大学附属西京 医院 妇产科实验室。培养基RPMI1640购自Gibco brL公司，小牛血清购自杭州四季青生物公司，胰酶购自sigma公司。塞来昔布购自山西威尔克科技发展公司，并溶于100％二甲基亚砜中，存于4 ℃备用。细胞培养与流式细胞分析均于山西医科大学中心实验室进行。 方法 细胞的培养： 人宫颈癌细胞株（Hela和Siha）采用RPMI 1640培养液，内含10％灭活小牛血清，常规培养于37 ℃、5％CO2、饱和湿度的孵箱中，用％胰酶消化传代。 与药物共同孵育后经流式细胞仪分析： 选对数生长期的细胞按1×105/mL的浓度接种于六孔培养板中，次日更换培养液后与不同浓度的塞来昔布共同孵育，使其终浓度分别为 μmol/L，25 μmol/L，50 μmol/L，并设相应的空白对照组，空白对照组及各不同浓度组均做两瓶。共同培养72 h后胰酶消化（％），收集细胞制成1×106/mL的单细胞悬液，加入4 ℃预冷的70％乙醇固定细胞，PBS漂洗2次，用1 mL PBS液重新悬浮细胞，加碘化丙啶，避光染色20 min后通过流式细胞仪检测,应用DNA细胞周期分析软件， 计算 出各样品DNA含量，分析细胞周期及凋亡率。细胞的增殖活性以增殖指数( proliferative index, PI )表示，计算公式为: PI(%)=（S％+G2～M％）/（G0～G1％+S％+G2