实验1 蛋白质的沉淀反应和两性反应.docVIP

PAGE PAGE 2 实验1 蛋白质的沉淀反应和两性反应 一、原理 蛋白质的分子量很大，分子大小在胶体颗粒范围之内，它对水的亲合力很大，故多在水溶液中形成亲水胶体。它有两个稳定因素，即电荷和水膜，除去这两个稳定因素，蛋白质胶粒即凝集下沉，有此沉淀的蛋白质并未变性，在一条件下能复溶；如盐析时所得的沉淀，称为可逆性沉淀；有此沉淀的蛋白质已变性，无法再复溶，如加重金属盐及三氯醋酸等蛋白沉淀剂所得的沉淀，称为不可逆性沉淀。 二、试剂 5%的卵蛋白溶液（新鲜鸡蛋清：水==1：9） 10%的三氯醋酸溶液 饱和（NH4）2SO4溶液 4、（NH4）2SO4粉末 5、3%AgNO3溶液 三、操作 1、用三氯醋酸（或苦味酸、鞣酸等）沉淀蛋白质。三氯醋酸等游离出来的负离子能和蛋白质分子游离出的正离子结合成不溶性的蛋白盐而沉淀。 取5%卵蛋白溶液1ml，加10%的三氯醋酸溶液4滴。观察有无沉淀产生？加蒸馏水约3ml沉淀能否溶解？ 2、蛋白质的盐析，用高浓度中性盐使蛋白质从溶液中沉淀出来的方法称盐析。常用的中性盐有（NH4）2SO4、、、NaCl等。高浓度中性盐能使蛋白质沉淀是因为它具有脱水性，能脱去蛋白质胶粒水膜，又有中和蛋白质胶粒外双电层电荷的作用。不同蛋白质盐析时所需盐浓度不同，故调节盐浓度，可适当地将蛋白质分开。如球蛋白在半饱和硫酸铵溶液中沉淀，清蛋白在饱和硫酸铵溶液中沉淀，用盐析法沉淀的