代谢性骨病PPT课件.pptVIP

二、骨标本的制作与染色 （一）骨组织标本的制作 1取材 2脱钙骨标本的制作 （1）固定：液体、时间、温度、冲洗 （2）脱钙：酸类脱钙和螯合剂脱钙 （3）脱水：正丁醇或叔丁醇 （4）透明：二甲苯、甲苯、氯仿 （5）浸透与包埋：熟蜡；蜂蜡；火棉胶等； （6）切片： * （二）不脱钙骨标本的制作 1用途：骨组织形态计量学；四环素、钙黄绿素(calcein)的骨代谢动力学研究。 2优势；无明显组织变形，动态参数获取。 3主要试剂： ⑴甲基丙烯酸甲酯 (methyl methacrylate,MMA); ⑵甲基丙烯酸羟乙基酯 (hydroxyethl methacrylate,HEMA); ⑶乙二醇异丁烯酸酯 (glycol methacrylate,GMA) * 4机制：液态单体，经加速剂、增塑剂（或加热、紫外线）作用后发生聚合作用，形成与骨组织硬度相似的无色透明体。 5方法： ⑴固定：梯度乙醇；4%多聚甲醛；4°C ⑵脱水：70%乙醇，48h→95%乙醇，48h→100%异丙醇，24h，2次→二甲苯24h ⑶包埋液配制： ①甲基丙烯酸甲酯： A液：60ml甲酯＋35ml丁酯＋5ml苯丙酸甲酯＋ 1.2ml聚乙二醇400 B液：100mlA液＋0.4g干燥过氧化苯甲酰 C液：100mlA液＋0.4g干燥过氧化苯甲酰 * ②甲基丙烯酸羟乙基酯 A液：HEMA80ml＋聚乙二醇40012ml＋水8ml＋过氧化苯甲酰6g; B液：聚乙二醇40015ml＋1ml N,N二甲基苯甲胺 工作液：42ml A液＋1ml B液 ⑷包埋：温度控制和真空控制…… ⑸切片: ⑹脱包埋剂：二甲氧基乙酸乙酯和丙酮….. ⑺染色…… * （三）电镜标本的制作 （四）骨磨片的制作 （五）骨切片的染色 1 脱钙骨切片的染色 HE： Masson：成熟骨组织蓝绿色 Mallory：骨组织淡蓝色，骨细胞红色 Van Gieson：骨基质胶原纤维红色，骨细胞淡黄色，胞核蓝黑色 Gomeri：网状纤维黑色，胶原纤维紫红色，骨组织灰色 * 2 骨磨片的染色 银染：骨板黄色，哈佛管、骨陷窝及骨小管黑色 苦味酸-硫堇染色：骨基质黄褐色，骨陷窝和骨小管暗黑色 结晶紫染色：骨陷窝、骨小管和哈佛管蓝紫色 3 非脱钙骨切片的染色 Goldner-trichrome三色法：骨组织绿色，类骨质红色，骨细胞浆黄色，核灰褐色 甲苯胺蓝染色：钙化骨蓝色，类骨质亮蓝色，骨细胞深蓝色 Van Kossa：钙化骨黑色，类骨质淡紫色，骨细胞红色 * 4 酶组织化学染色 酸性磷酸酶染色：着色部位蓝色 碱性磷酸酶染色 5 分子生物学方法 免疫组织化学 原位杂交 流式细胞仪 多聚酶链反应 组织芯片技术 * 朱宪彝1981年阐述的代谢性骨病 1 原发性甲旁亢，纤维性囊性骨炎 2 肾性骨病 3 佝偻病、软骨病 4 骨质疏松 5 Paget 骨病（畸形性骨炎） 6 氟骨病 7 成骨不全（脆骨病） 8 磷酸酶缺乏症 9 骨硬化症（石骨病，大理石骨症） * 近年来认识的代谢性骨病 1 骨质疏松症 绝经后骨质疏松 老年性骨质疏松 特发性青少年骨质疏松 男性骨质疏松 废用性骨质疏松 2 骨质硬化症 3 甲状旁腺疾病 * 4 佝偻病和骨质软化症 5 维生素D不敏感综合症 6 甲状旁腺素不敏感综合症和过敏感综合症 7 钙受体病综合症 8 地方性氟骨病 * 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 医学卫生。 教学培训。 代谢性骨病Metabolic bone disease 天津医科大学病理学教研室 章明放 * 定义：指各种原因所致的以骨代谢紊乱为主要特征的骨疾病。属代谢性疾病的范畴。以骨重建（bone remodaling）紊乱所致的骨转换率异常、骨痛、骨畸形和骨折为特征。依病因和病理特征： 1 骨质疏松 (osteoporosis) 2 骨质软化 (osteomalasia) 3 骨质硬化 (osteopetrosis) 4 混合性骨病 (mixed