基因工程基本操作程序.pptVIP

③常用法： ②常用菌： ①微生物作受体细胞原因： 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少 ④过程： 大肠杆菌 Ca2+处理获得感受态细胞 Ca2+处理 大肠杆菌 感 受 态 细 胞 表达载体 与感受态 细胞混合 感受态细胞 吸收DNA ___感受态细胞法 （3）将目的基因导入微生物细胞 第三十一页，共51页 例： 第三十二页，共51页 若通过基因过程生产人的糖蛋白可以用大肠杆菌作为工程菌吗？ 答：不可以，糖蛋白上的糖链是在内质网和高尔基体上加工完成，而内质网和高尔基体存在真核细胞中，大肠杆菌是原核生物，细胞中不含这两种细胞器。 以酵母菌作为工程菌可以吗? 答：可以，酵母菌为真核生物（真菌类）。 第三十三页，共51页 四 目的基因的检测与鉴定——检查是否成功 导入过程完成后，全部受体细胞都能摄入重组 DNA分子吗？ 真正能摄入重组DNA分子的受体细胞很少。 目的基因进入受体细胞后，是否都能稳定维持 和表达？ 不一定，需要检测 1.检测方法： 分子杂交技术： （1）DNA分子与DNA分子的之间杂交 （2）DNA分子与RNA分子的之间杂交 （3）蛋白质分子（抗原与抗体）之间杂交 2.个体生物学水平的鉴定： 抗虫、抗病结种实验，活性比较实验 第三十四页，共51页 1.检测 转基因生 物的DNA 探针 15N 15N 14N 14N （1）检测转