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基因工程工具酶 (2) 第一页，共41页 一、限制性内切酶 （一）、限制修饰系统的种类 （二）、限制性内切酶的定义、命名 （三）、限制酶的特点 （四）、异源同序酶（isoschizomer，同裂酶） （五）、 限制酶的用途 第二页，共41页 （一）、限制修饰系统的种类 1.?I型：由三个基因构成，hsdR；hsdM；hsdS（host specificity for DNA restriction modification and specificity）位于染色体上，三个基因构成一个复合体，限制酶需要ATP、Mg2+、SAM（５—腺苷甲硫氨酸），无特异切割位点。 2.?II型：限制与修饰基因产物独立起作用，在Ｅ. coli中这两种基因位于质粒上。 3.?III型：修饰酶与Ｉ型酶相同，hsdＭ与hsdＳ基因产物结合成一亚单位，限制酶是独立存在的。 上述三个系统中，只有II型限制酶与甲基化酶具有相当高的核苷酸识别特异性，因而被广泛用于基因工程中。 第三页，共41页 （二）、限制性内切酶的定义、命名 1. 定义：广义指上述三个系统中的限制酶； 狭义指II型限制酶。 2. 命名：限制酶由三部分构成，即菌种名、菌系编号、分离顺序。 　例如：HindⅢ　　前三个字母来自于菌种名称H. influenzae，“ｄ”表示菌系为ｄ型血清型；“Ⅲ”表示分离到的第三个限制酶。 Ec