碱性成纤维细胞生长因子对大鼠骨髓基质细胞体外诱导分化的影响临床医学.docVIP

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠骨髓基质细胞体外诱导分化的影响临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：碱性成纤维细胞生长因子对大鼠骨髓基质细胞体外诱导分化的影响临床医学 1 1 材料与方法 2 2 结果 4 3 讨论 4 文2：丙泊酚瑞芬太尼对大鼠缺血再灌注损伤肺泡细胞凋亡的影响临床医学 5 1 材料和方法 6 2 结果 7 3 讨论 9 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 碱性成纤维细胞生长因子对大鼠骨髓基质细胞体外诱导分化的影响临床医学 文1：碱性成纤维细胞生长因子对大鼠骨髓基质细胞体外诱导分化的影响临床医学 【Abstract】 Objective To study the influence of basic fibroblast growth factor（bFGF） on the growth of bone marrow stromal cells（BMSC）. Methods Bone marrow stromal cells（BMSC） were isolated from both femur in Wistar rats using all-bone marrow culture method. After subculture of the cells, the cells were induced to osteoblasts by osteogenic inducer. The bFGF were added into culture medium of bFGF group, and control group were cultured without bFGF. By MTT method, the effect of bFGF on proliferation of BMSC was evaluated in vitro. Results The increase of bFGF group was more active than BMSC group（P）. Conclusion bFGF has the ability to promote on bone marrow stromal cells proliferation into osteoblasts. 【Key words】 basic fibroblast growth factor;bone marrow stromal cell;proliferation 骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells，BMSC）具有多向分化潜能，它可在不同的生物环境和因子的作用下向相应的方向转化，参与细胞再生。碱性成纤维细胞生长因子（basic fibmblastgrowth factor，bFGF）对体外培养条件下BMSC贴附、增殖、分化的影响仍存在争议，并认为其作用与加入的时间、剂量有关。本实验旨在探讨以BMSC作为骨组织工程的种子细胞进行体外定向诱导培养时bFGF对其增殖的影响。 1 材料与方法 实验材料 （1）实验动物：Wistar大鼠，雌性，6周龄（合格证书：医动字第14－006号）。（2）主要试剂及仪器设备：青、链霉素，高糖DMEM培养基（GIBCO），胎牛血清（中美合资兰州民海生物工程有限公司），胰蛋白酶（AMRESCO），地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠、MTT（SIGMA），二甲基亚砜（北京亚太精细化工公司），倒置相差显微镜（OLYMPUS），OG3022A型酶联免疫检测仪（南京华东 电子 集团医疗装备有限公司），超净工作台（苏净集团安泰公司），二氧化碳孵箱（日本SANYO），TDL-5离心机（上海安宁 科学 仪器厂） 实验方法 （1）原代细胞培养：颈椎脱位处死大鼠，75%的酒精中浸泡5min后取出，无菌条件下取出双侧股骨，经无菌生理盐水漂洗干净后剪除股骨干的两端，暴露骨髓腔，注射器针头插入髓腔，用DMEM培养液冲洗髓腔，冲出的骨髓细胞放于离心管中，1000rpm离心10min，弃上清，用含10％FBS，青、链霉素各100u/ml的DMEM培养液5ml制成骨髓细胞悬液，以次用8号和4号针头抽吸细胞悬液两次，将细胞过滤为单细胞悬液，计数有核细胞后以2×105 /cm2种植于培养瓶内，37℃二氧化碳孵箱中培养，CO2浓度5%，湿度95%。3天后首次换液，以后每隔3～5天换液1次。（2）传代细胞培养：原代细胞培养12～16天细胞生长融合，吸出培养液，用37℃ 1×PBS洗细胞2次，用%的胰蛋白酶消化细胞5min，镜下观察细胞变形后立即加入含有10%的