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狗慢性膝关节炎症期滑膜组织中细胞因子的表达 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：狗慢性膝关节炎症期滑膜组织中细胞因子的表达 1 1 材料与方法 2 2 结果 3 3 讨论 3 文2：关节镜下滑膜切除联合射频汽化治疗膝关节滑膜 5 41 mm/h。 5 2 结果 6 3 讨论 6 4 参考文献 7 参考文摘引言： 8 原创性声明（模板） 9 文章致谢（模板） 9 正文 狗慢性膝关节炎症期滑膜组织中细胞因子的表达 文1：狗慢性膝关节炎症期滑膜组织中细胞因子的表达 Abstract： Objective To examine the changes in some cytokines (TNFα, IL1β, IL6, IL10) in chronic inflamed knee joint synovium tissue of dogs. Methods Knee joint synovium tissue was taken from nine Beagle dogs with chronic knee arthritis and eight dogs with normal knee joints. Cytokines were detected using ELISA. Results The expression of IL1β and IL6 in the chronic inflamed group was significantly higher than that in the normal group (P). Conclusion Chronic inflammation enhances the expression of IL1β and IL6 in knee joint synovium tissue of dogs. Key words： Beagle dog; inflammation; knee joint; tumor necrosis factor; interleukin 细胞因子是一类分泌型糖蛋白，由淋巴细胞、单核巨噬细胞、成纤维细胞等产生，它能活化淋巴细胞，调节淋巴细胞及其他细胞的生长和分化，增强免疫应答及炎症细胞的代谢和功能。但它也有致病作用，例如内毒素性休克、介导自身免疫疾病。炎症状态下细胞因子之间的相互调节和相互制约形成了复杂的细胞因子 网络 ，介导炎症反应的 发展 和转归。本研究测定狗膝关节慢性炎症期滑膜组织中细胞因子TNFα、IL1β、IL6、IL10的表达水平，探讨它们在外周局部慢性炎症时期的可能作用。 1 材料与方法 动物与分组 Beagle狗17条，随机分为慢性非感染性炎症组（n＝9）和对照组（n＝8） 主要试剂和仪器 Ⅰ型胶原酶（用生理盐水配成浓度为2%），ELISA试剂盒（含酶标板，二抗，Biotin，HRP， TMB，终止液等。购自美国RB公司），酶标仪。 1．3 方法与步骤 慢性非感染性炎症组双侧后肢膝关节腔内注射2%的I型胶原酶 ml，72 h 后取双侧后肢膝关节腔内滑膜组织。对照组也取双侧后肢膝关节滑膜组织。离体后迅速将滑膜组织标本置液氮中保存。采用双抗体夹心ELISA方法测定组织标本中各种细胞因子浓度[1]。提前15 min 配制工作液。加入100 μl 标准品、100 μl 标本于相应反应孔中，混匀，37 ℃ 温育90 min，洗涤液反复洗涤5次。每孔加入100 μl 1× Biotin，混匀，37 ℃ 温育60 min，洗涤液反复洗涤5次。每孔加入100 μl 1×HRP，混匀，37 ℃ 温育30 min，洗涤液反复洗涤5次。每孔加入100 μl TMB显色液，混匀，37 ℃ 暗处温育(15±10)min。每孔加入100 μl 终止液，混匀，30 min 内在450 nm 处读OD值。以OD值为纵坐标，以标准品浓度为横坐标，绘制标准曲线。根据样品的OD值可在标准曲线上查出其浓度。 1．4 统计学方法 计量资料均以均数±标准差( x±s)表示。采用统计软件行非配对t检验 ，P表示差异有统计学意义。 2 结果 与正常滑膜组织相比，慢性非感染性炎症组滑膜组织内IL1β、IL6浓度显著增高，P ； TNFα、IL10浓度无明显变化，P。详见表1。 表1 两组滑膜组织中细胞因子浓度比较（略） 与对照组比较，①P；②P 3 讨论 众所周知，炎症反应时多种炎症因子发挥了重要作用。既往许多实验，对全身或局部炎症状态下的相关炎症因子进行了研究，而未见有对于狗慢性膝关节炎症的报道。本实验侧重于研究狗慢性膝关节炎症时期，与炎症反