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遗传学实验报告 第X小组 1 核型分析 01 2 实验材料 3 4 5 1．准备染色体标本的相片：将制作的细胞轮廓清楚，染色体集中而不重叠，主、次缢痕和随体清晰，染色体长度适中而不弯曲的染色体标本，通过显微摄影（或描绘）、冲洗、放大成染色体相片。 2．染色体测量：目测相片上每条染色体长度，按长短顺序初步编号，写在每条染色体相片背面，用钢尺逐个测量每条染色体长度，计算相对长度、臂比及着丝粒位置。 3．排列核型图：按上述结果结合目测，将照片上的染色体配对，重新编号。着丝粒排在同一水平线上，短臂在上，长臂在下。排好后进行分析比较，确定其核型是否正常。若要准确细致分析，必须进一步运用染色体显带技术。 4．绘制核型模式图：根据前面的计算结果和排列的核型图，用座标纸绘制核型模式图。横座标为染色体序号，纵座标为染色体（臂）的相对长度，“0”为长、短臂的分界线，长臂在下，短臂在上。 6 ·染色体两端不能留白纸，两侧可以留1 mm白边。 ·开始剪纸不要讲话，防止染色体被吹走。 ·一个短臂缺失染色体;一个带随体染色体。 ·染色体在坐标纸上要等着丝点粘贴。 ·整体匀称，少用粘胶，洁净美观。 7 核型通常是指生物体细胞染色体所有可测定的表型，包括染色体的总数，染色体组的数目，组内染色体基数、每条染色体大小、形态等。它是物种特有的染色体信息之一，具有很高的稳定性和再现性。核型分析是对染色体进行分组，对核型的各种特征进行定量和定性的描述，如对染色体长度、着丝点位置、臂比和随体有无等。 虽然染色体组型一般是以处于体细胞有丝分裂中期的染色体的数目和形态来表示，但是，也可以其他时期，特别是以前期或分裂间期的染色体形态来表示。减数分裂时期的染色体同样也可以进行核型分析。关于整个染色体的情况可作下列记载而加以表示：各自的长度、粗细；着丝粒的位置；随体及次缢痕的有无、数目、位置；凝缩部不同的部分以及异染色质部分、常染色质部分；染色粒、端粒的形态、大小及分布情况；小缢痕的数目、位置；由于温度和药品处理所产生的染色体分带（band）的形态、数目、位置等等。 8 核型公式：2n＝_4_M＋ _6_SM＋ _19_ST＋ 1T =30 9 小组内小组间自由组合讨论： 10 植物细胞染色体制片与有丝分裂过程的观察 02 11 实验材料 12 13 14 1.采根:水仙(2n=2x=22; 2n=3x=30)水培取幼根0. 5-1 cm。 2.前处理:饱和对二氯苯溶液2-4小时。 3.固定:卡诺氏固定液:酒精:冰醋酸一3:1。 4.漂洗:95%一90%一85%-}-80%一75%酒精梯度漂洗。 5.保存:75%酒精。 6.解离:流水冲洗３min→吸水纸吸干→放入小试管中→加适量1 mol/L HCl解离10～15min。 7.制片:选取已处理过的根尖一枚，吸去多余水分，放在垫有滤纸的干净载玻片中央。滴一小滴染色液，用镊子将根尖夹碎，然后加盖玻片，复以滤纸压片，先用拇指适当用力下压，使根尖细胞分散均匀，再用铅笔橡皮头轻敲几下，注意勿使盖玻片平移，压好片子即可镜检。 9.镜检:先用低倍镜“Z”字形整个盖玻片全面查找，后考虑用高倍镜观察绘图。 ·把根尖吸附的水分充分吸干。 ·前处理抑制和破坏纺锤丝的形成，使根尖细胞延迟其染色体的分离，增加中期分裂相。 ·染色液加半滴，太多用滤纸吸取部分。 ·离开前原位放好显微镜关闭灯光电源等并洗净载玻片。 15 1.高等植物有丝分裂主要发生在根尖、茎尖生长点及幼叶等器官的分生组织，这些分生组织均可以用作制片材料。 2.植物细胞的细胞壁对细胞形态和结构起支撑和保护作用，分生组织的细胞壁结构将分生细胞结合成一个整体，因此在压片之前需要采用适当方法软化或部分分解细胞壁使细胞间易于分离，这一操作称为解离。同时，解离也可适当清除部分细胞质，使细胞质背景趋于透明化，便于观察染色体。 3.常用的解离方法主要有酸解法和酶解法，还有碱法。 16 有丝分裂后期 有丝分裂中期 有丝分裂中期 17 18 植物组织DNA的粗提 03 19 实验材料 20 21 [提取DNA应遵守的原则] 1. 保持核酸分子一级结构的完整性； DNA含有生物体的全部基因。一般情况下，随着生物由低级进化到高级，所含DNA的相对分子质量也由小到大递增。最小的病毒DNA有几千碱基对，细菌DNA有几百万碱基对，而高等动植物DNA可达几十亿碱基对。遗传信息全部储存在一级结构之中，因此，提取DNA样品时要尽量保证DNA分子的完整性。如果所得到的DNA样品在制备过程中已经降解，则在许多研究工作中难以得到正确的结果。为了确保分离DNA的完整性，在实验中应做到以下几点：一是温度不宜过高；二是控制一定的pH范围（pH 5～9），过酸或过碱均能造成DNA链中磷酸二酯键；三是保持一定的离子强度，对维持空间构型有一定