阿托伐他汀对心肌梗死后大鼠梗死区及非梗死区心肌细胞凋亡及血浆BNP水平的影响临床医学.docVIP

阿托伐他汀对心肌梗死后大鼠梗死区及非梗死区心肌细胞凋亡及血浆BNP水平的影响临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：阿托伐他汀对心肌梗死后大鼠梗死区及非梗死区心肌细胞凋亡及血浆BNP水平的影响临床医学 1 1 材料与方法 2 2 结 果 3 3 讨 论 3 文2：雷米普利对心肌梗死后心衰大鼠非梗死区胶原的抑制作用 4 1 材料与方法 6 2 结 果 8 3 讨 论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 阿托伐他汀对心肌梗死后大鼠梗死区及非梗死区心肌细胞凋亡及血浆BNP水平的影响临床医学 文1：阿托伐他汀对心肌梗死后大鼠梗死区及非梗死区心肌细胞凋亡及血浆BNP水平的影响临床医学 最新报道表明在缺血再灌注(I/R)早期，他汀可以抑制心肌细胞的凋亡，减轻I/R损伤，并能减小梗死面积，从而改善心功能〔1〕。但是对梗死后缺血中他汀是否对心肌细胞的凋亡有影响目前尚无报道。本实验通过持续结扎前降支冠状动脉制作心肌梗死动物模型，研究阿托伐他汀对实验性心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡及血浆B型钠尿肽(BNP)水平的影响。 1 材料与方法 动物及分组 Wistar雄性大鼠60只购自吉林大学动物实验中心，平均体重(+)g。采用结扎左冠脉前降支方法，乙醚吸入麻醉后，仰卧位固定于手术台，剪去胸前鼠毛，75%酒精消毒，先用10号缝线在开胸部位做一荷包，自左侧3～4肋间开胸，打开心包膜，暴露心脏，于肺动脉圆锥及左心房找出做冠状动脉前降支，除假手术组8只仅穿线不结扎外，其余各组均以0号线结扎冠脉，术后将心脏送回胸腔，并挤出胸腔内的血液和气体，迅速收拢荷包关闭胸腔，整个开胸时间不超过30 s，假手术组仅穿线不结扎。术中大鼠死亡18只，死亡率30%。术后常规给予腹腔注射青霉素20万U/kg抗炎7 d。将CTnT水平大于 ng/ml的31只大鼠随机分为对照组15只，实验组16只。假手术组及对照组正常饮食，实验组给予正常饮食+阿托伐他汀(10 mg·kg-1·d-1) 试剂及测定方法 ELISA试剂盒、BNP、心脏肌钙蛋白T(CTnT)购自武汉博士德。结扎大鼠前降支冠状动脉后48 h取大鼠尾静脉血清2 ml，加入 ml组织裂解缓冲液(1%Triton X100，，50 mmol/L TrisHCl;150 mmol/L NaCl;2 mmol/L EDTA;2 mmol/L PMSF;1 mmol/L NaF;4 μg/ml亮抑酶肽;1 μg/ml抑肽酶)，4℃组织匀浆，以2 000 min，4℃离心10 min，取上清液再以12 000 min，4℃离心30 min，回收上清液，操作严格按说明书进行，并 计算 CTnT水平，对假手术组和手术组CTnT大于 ng/ml的大鼠继续常规喂养。采用ELISA法测血浆BNP水平〔2〕 流式法测梗死区心肌细胞凋亡率 大鼠取血后将心肌组织处理成单细胞悬液，70%冷乙醇固定，离心洗去乙醇，弃上清，调整细胞数为1×106个/ml，过350目滤网，RNAse水浴30 min，加入PI(碘化丙锭)混匀，4℃作用30 min，上机检测。细胞周期各时相DNA含量用百分比表示。 统计学处理 数据用x±s表示，采用软件进行单因素分析和方差下的t检验。 2 结 果 各组大鼠血清中CTnT水平变化 结扎前降支48 h后测血清中CTnT水平：假手术组〔(±)ng/ml〕明显低于手术组〔(±)ng/ml〕(P)，表明结扎冠状动脉后出现心肌坏死。 各组大鼠血浆中BNP水平变化 实验组血浆中BNP水平〔(±)pg/ml〕明显高于假手术组〔(±)pg/ml〕，明显低于对照组〔(± )pg/ml〕(均P) 各组大鼠心肌细胞凋亡检测结果 梗死区心肌细胞凋亡率对照组(%±%)和实验组(%±%)均明显高于假手术组(%±%)(P);实验组梗死区心肌细胞凋亡率明显低于对照组(P)。对照组非梗死区凋亡率(%)明显高于实验组(%)(P)。实验组和对照组梗死区和非梗死区心肌细胞凋亡率均高于假手术组(P) 3 讨 论 目前已经在多种心脏标本中，如：急性心肌梗死、缺血性心肌病、扩张型心肌病等患者的心脏中都证实有细胞凋亡现象存在，而且凋亡是老年心脏心肌细胞数量减少的主要原因〔2，3〕。干预心肌细胞凋亡已成为 治疗 心血管疾病的重要目标之一。他汀类药物为羟甲基戊二酰辅酶A(HMGCoA)还原酶抑制剂，抑制内源性胆固醇的合成，为血脂调节剂。目前其“多效性”作用包括抗炎〔4，5〕、抗氧化〔6，7〕、稳定斑块、改善内皮功能〔8〕及调节免疫、动员内皮祖细胞〔9〕、抗心律失常及预防猝死〔10〕等作用。BNP由心室肌合成，与左室舒张末压