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植物超氧化物歧化酶的制备工艺研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：植物超氧化物歧化酶的制备工艺研究 1 1 材料与方法 2 2 结果 4 3 讨论 6 文2：逐瘀通脉滴丸的制备工艺研究 8 1 仪器与试药 9 2 方法与结果 10 3 讨论 13 参考文摘引言： 14 原创性声明（模板） 15 文章致谢（模板） 15 正文 植物超氧化物歧化酶的制备工艺研究 文1：植物超氧化物歧化酶的制备工艺研究 Abstract：ObjectiveTo optimize the extraction technology of superoxide dismutase from plants. MethodsWe extracted SOD from the cucumber by heat treatment , isoelectric fraction, ammonium sulfate fractionation and ion exchange chromatography, Coomassie brilliant blue G-250 was adopted to determine the content of the protein and NBT-reduction was used to measure the SOD activity. Meanwhile, the purified substance was identified as SOD by the polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and SOD activity staining. ResultsSOD had a specific activity of U·mg-1. The yield rate was %, and the multiplication was as times. ConclusionThe technology is an extraction technology of superoxide dismutase form plants simply and efficiently and it will be a good reference for the production. Key words：Superoxide dismutase(SOD)； Extraction technology； Activity of SOD 超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)，作为一种专一清除生物体内超氧阴离子自由基(O2-·)的酶，催化超氧阴离子自由基发生歧化反应，减少超氧阴离子自由基对生物体的毒害。目前，人们已从动物、植物和微生物体内分离得到，并且通过多种方法应用到实际中［1］，如应用到医药方面、食品、农业、化妆品及人和动植物许多疾病的监测方面等。 植物超氧化物歧化酶的制备工艺，其主要目的是纯化植物中的SOD，最大限度地清除杂蛋白，因此，常用的方法主要有热变性法、等电点沉淀法、盐析法、有机溶剂沉淀法、超滤法、层析法等［2］。而本文主要探究超氧化物歧化酶的制备工艺，比较几种常用工艺，热变性法和等电点沉淀法简单，不需加其他试剂，但不能大幅度提高SOD的比活；盐析法有利于保持蛋白质的生理活性，但分辨率低［3］；离子交换层析主要用于高纯度的SOD精品的制备，处理量小。本研究将几种简单工艺相结合，扬长避短，找出一套既简便又能有效提高SOD纯化倍数的方法。 1 材料与方法 材料与试剂 黄瓜；氯化硝基四氮唑蓝(NBT)、甲硫氨酸、二乙基氨基乙基纤维素(DEAE)、四甲基乙二胺(TEMED)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、丙烯酰胺(国药集团化学试剂有限公司)、甲叉双丙烯酰胺( 中国 医药集团上海化学试剂公司)等化学试剂均为分析纯；标准蛋白采用上海生物化学试剂公司产的牛血清白蛋白；考马斯亮蓝G-250(上海化学试剂分装厂) 仪器 722光栅分光光度计(上海精密 科学 仪器有限公司)；DYY-Ⅲ2稳压稳流电泳仪(北京市六一仪器厂)；电热恒温水浴锅 JK-S26型(上海华联医疗器械有限公司)；高速冷冻离心机D-37520(Osterode Kendro Laboratory Products)；LGJ-10冷冻干燥机(军事医学科学院实验仪器厂研制，北京松源滑行科技 发展 有限公司制造) ；HD-3紫外检测仪(上海沪西分析仪器厂)；DHL-A电脑恒流泵(上海沪西分析仪器厂)；DBS-100电脑全自动部分收集器(上海沪西分析仪器厂) 方法 将黄瓜用清水洗净，称取1