左金丸方药3种方法提取液的初步药效学比较.docVIP

左金丸方药3种方法提取液的初步药效学比较 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：左金丸方药3种方法提取液的初步药效学比较 1 结果见表2。 5 文2：抗眩晕方药两种方法提取液的成分比较 5 1 仪器与药品 6 2 方法与结果 6 3 讨论 10 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 11 正文 左金丸方药3种方法提取液的初步药效学比较 文1：左金丸方药3种方法提取液的初步药效学比较 左金丸是由黄连与吴茱萸按6∶1比例制成的水丸，具泻火、疏肝、和胃、止痛功能，为辛开苦降的代表方剂， 现代 临床上常用于 治疗 胃炎、胃脘痛、消化性溃疡等疾病。现代药理研究表明，左金丸具有抗溃疡、抑菌、抗炎等作用。 目前对左金丸方药的水提取液、60%乙醇提取液和半仿生提取液的抑菌、抗炎的药效作用的研究未见报道。本研究以左金丸方药的水提取液（WE液）、60%乙醇提取液（AE液）和半仿生提取液（SBE液），采用抑菌环实验和二甲苯致小鼠耳肿胀法分别评价左金丸的AE液、SBE液、WE液的抑菌、抗炎的药效作用。 1 抗（抑）菌实验（抑菌环实验） 利用抑菌剂不断溶解琼脂，扩散形成不同浓度梯度，以显示其抑菌作用。实验通过抑菌环大小以判断其是否具有抑菌能力。本实验适用于抑菌剂与溶出性抗（抑）菌产品的鉴定。 器材金黄色葡萄球菌 (ATCC 6538)、大肠杆菌(8099) 菌悬液，抑菌剂载体 (5 mm 直径圆形新华一号定性滤纸片，经压力蒸气灭菌处理后，置120℃烤干2 h，保存备用)，微量移液器(5～50 μl，可调式)，游标卡尺，营养琼脂培养基。 供试液的制备提取前将黄连、吴茱萸药材分别粉碎，过14目筛。 水提取液按照处方比例分别称取黄连粗粉12 g， 吴茱萸粗粉2 g，用水加热回流提取 3 次，时间分别为2，2，1 h，加水量依次为药材量的10，8，8倍，4层纱布加100目筛滤过，合并提取液，减压浓缩至60 ml样品液（每毫升相当于原药材 g） 60%乙醇提取液按照处方比例分别称取黄连粗粉12 g，吴茱萸粗粉2g,用60％乙醇浓度加热回流提取工艺提取，回流3次，时间分别为2，2，1 h，加醇量依次为药材量的10，8，8倍，4层纱布加100目筛滤过，合并提取液，回收乙醇，减压浓缩至60 ml样品液（每毫升相当于原药材 g） 半仿生提取液按照处方比例分别称取黄连粗粉12 g,吴茱萸粗粉2 g, 混匀，加热回流提取3次（加水量依次为药材量的10，8，8倍，用水煎煮3次，第 1 煎用水以 mol/L HCl调至；第2、3煎用水依次以 mol/L NaOH 调至pH ，；煎煮时间依次为170 min,85 min,40 min），提取液用 4 层纱布加100目筛分别滤过，离心（2 000 min,20 min）,合并上清液，减压浓缩至60 ml样品液（每毫升相当于原药材 g） 操作程序 抑菌片的制备取无菌并干燥的滤纸片，制成直径为 5 mm，厚不超过 4 mm 圆片(块)，每 4 片(块) 1 组，每片滴加项下 3 种供试液各20 μl，然后将滤纸片平放于清洁的无菌平皿内，开盖置温箱(37℃) 中烤干后备用。 阴性对照样片的制备取无菌干燥滤纸片，制成与试验组大小相同的样(块)。每片滴加无菌蒸馏水 20 μl，干燥后备用。 试验菌的接种用无菌棉拭子蘸取浓度为 5×105～5×106cfu/ml 试验菌悬液，在营养琼脂培养基平板表面均匀涂抹3 次。每涂抹1 次，平板应转动 60°，最后将棉拭子绕平板边缘涂抹1周。盖好平皿，置室温干燥 5 min。 抑菌剂样片贴放每次试验贴放1 个染菌平板，每个平板贴放4 片试验样片。用无菌镊子取样片贴放于平板表面。各样片中心之间相距 25 mm 以上，与平板的周缘相距 15 mm 以上。贴放好后，用无菌镊子轻压样片，使其紧贴于平板表面。盖好平皿，置37℃温箱，培养16～18 h 观察结果。用游标卡尺测量抑菌环的直径 (包括贴片) 并记录。试验重复3 次。 测量抑菌环时，应选均匀而完全无菌生长的抑菌环进行。 测量其直径应以抑菌环外沿为界。 评价标准规定 抑菌作用的判断:抑菌环直径大于 7 mm 者，判为有抑菌作用；抑菌环直径小于或等于7 mm 者，判为无抑菌作用。 抑菌结果见表1。表1 左金丸提取液抑菌结果 小结左金丸提取液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有抑制作用，按抑菌环的大小判断，对金黄色葡萄球菌的抑制作用强于大肠杆菌。抑菌环的大小顺序为：半仿生提取液水提液醇提液，可见左金丸3种提取液的抑菌效果为：SBE液 WE液 AE液。 2 抗炎实验 动物昆明种小鼠，由山东大学试验动物中心提供，许可证号SCXK（鲁） 仪器JY20