前列腺素E1脂质体对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的保护作用临床医学.docVIP

前列腺素E1脂质体对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的保护作用临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：前列腺素E1脂质体对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的保护作用临床医学 1 1 材料与方法 2 2 结 果 4 3 讨 论 5 文2：银杏叶硒对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用临床医学 6 1 材料与方法 7 100g银杏叶双蒸水提取液浓缩为100ml。 8 2 结果 8 3 讨论 8 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 11 正文 前列腺素E1脂质体对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的保护作用临床医学 文1：前列腺素E1脂质体对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的保护作用临床医学 前列腺素E1(PGE1)具有舒张血管，抑制心肌多核中性粒细胞(PMN)及血小板的聚集和活化，稳定生物膜和细胞保护等作用，广泛用于治疗闭塞性动脉硬化、心肌缺血、休克等多种疾病〔1〕。我室与某生物技术公司合作，利用开逆向蒸发法及MFIC技术成功制备粒径大小适合，且均匀、包封率达到%以上的PGE1脂质体(Liposomal PGE1，LipoPGE1)。本研究观察了预灌注LipoPGE1对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响，观察LipoPGE1对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用。 1 材料与方法 实验动物 成年SD大鼠24只，200～250 g，雌雄各半，由第三军医大学野战外科研究所动物中心提供。 主要药品试剂 LipoPGE1由本单位合作制备，PGE1针剂为重庆药友制药有限责任公司产品(博乐斯)，批号040601。 方法 灌流液的配制 改良的KrebsHeeleit (KH)液组成成分(单位：mmol/L)：NaCl ，KCl ，CaCl2 ，MgSO4 ，KH2PO4 ，NaHCO3 ，EDTA ，Glucose 。先以超纯水配制成含NaCl、KCl、MgSO4、KH2PO4、NaHCO3、EDTA的母液，使用时稀释母液加入CaCl2和Glucose配制成所需浓度。 模型制作 用3%戊巴比妥钠( ml/100 g)腹腔注射麻醉后将大鼠背位固定,切开腹腔，下腔静脉注入3%浓肝素( ml/100 g)以防血栓形成。迅速开胸剪去胸廓，暴露心脏及大血管，剪断肺静脉。迅速取出心脏，在预冷(4℃) 改良的KH液中作主动脉插管,距主动脉根部3～4 mm处剪一小口，插入内径约3 mm的聚乙烯套管并结扎，再置于37 ℃保温灌流室内。另将导管插入心尖处左心室内，经换能器连在生理多导记录仪上，于Langendorff心脏灌流装置主动脉逆行灌注KH缓冲液预灌流15 min，以冲洗残留于心脏的血液，灌流液恒温(37℃)。恒压(60 mmHg),并为100%O2饱和。缺血40 min，再灌注40 min。 分组及用药 随机将24只大鼠分成3组，LipoPGE1治疗组，PGE1治疗组及对照组(IR组)，每组8只，IR组继续灌注KH液，治疗组自预灌流15 min持续灌注含药物 μmol/L的KH液。 心功能指标的测定 利用二通道生理记录仪分别测量各组缺血前、复灌20 min、复灌40 min时心功能指标：心率(Rate)、左室收缩压(LVDP)、左室舒张末压(LVEDP)、心室内压最大变化速率(±dp/dtmax) 生化指标检测 分段收集流出液(缺血前、复灌20 min、复灌40 min)，用4℃冷玻璃瓶收集冠脉流出液1～2 ml，采用乳酸测定法测定心肌乳酸脱氢酶(LDH)活性，荧光分光光度法测定磷酸激酶(CPK)活性。 心肌超微结构的考察 实验结束时，取左前壁心尖上方5 mm处的心肌组织，立即投入预冷的%戊二醛固定，经PBS漂洗，10%四氧化锇固定后,用不同浓度的酒精梯度脱水，再用丙酮脱水，100%丙酮与纯包埋剂1∶1混合包埋,加温聚合,定位修块，LKBV型超薄切片机切片，醋酸铀、柠檬酸铅 电子 染色，用透射电镜(H 300)观察超微结构的变化。 统计学处理 数据以x±s表示,采用软件包对IR 组进行随机分组设计的方差分析，对IR组、LipoPGE1组、PGE1组数据进行单因素方差分析及多重比较q检验。 2 结 果 各组心功能指标检测结果 缺血再灌注导致的心肌可逆性或不可逆性损伤均造成心肌舒缩功能降低，表现为心输出量减少，±dp/dtmax降低，LVEDP升高，经方差分析发现缺血前与复灌20 min、复灌40 min心功能指标有显著性差异(P，P)，说明动物模型构建成功。复灌20 min LipoPGE1组比对照组±dp/dtmax明显升高(P)，表明LipoPGE1对心肌缺血再灌注具有保护作用;LipoPGE1组±dp/