高效液相色谱法测定空心莲子草中穆坪马兜铃酰胺的含量.docVIP

高效液相色谱法测定空心莲子草中穆坪马兜铃酰胺的含量 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：高效液相色谱法测定空心莲子草中穆坪马兜铃酰胺的含量 1 1 仪器与试药 2 2 方法与结果 3 3 讨论 5 文2：高效液相色谱法测定心达康片的含量 5 1　仪器和试药 6 2　方法和结果 6 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 高效液相色谱法测定空心莲子草中穆坪马兜铃酰胺的含量 文1：高效液相色谱法测定空心莲子草中穆坪马兜铃酰胺的含量 Abstract：ObjectiveTo establish a determination method of the content of N-tra-feruloyl tyramine in Alternanthera philoxerodes. MethodsThe content of N-tra-feruloyl tyramine in Alternanthera philoxerodes was determined by HPLC and Alltima C18 column (250 mm× mm，5μm) was used .The mobile phase was a mixture of acetonitrile - water (25∶75),column temperature was 30℃, the flow rate was 1 ml·min-1 and the detection wavelength was 220 nm . ResultsThe calibration curve of N-tra-feruloyl tyramine was linear over the range of 1～ μg ,and the equation of linear regression was Y=696 －2 (r= 7).The average recovery rate was %(D=%).ConclusionThe methed is simple and the result is accurate. Key words：Alternanthera philoxerodes； N-tra-feruloyl tyramine； HPLC 空心莲子草Alternanthera philoxerodes （Mart.）Griseb为苋科莲子草属（Alternanthera）多年生宿根草本植物，又名空心苋、螃蜞菊、水花生等［1］。曾收载于《 中国 药典》Ⅰ部（1997年版），具有清热解毒、凉血利尿的功效。 现代 药理研究表明，空心莲子草具有抗流感病毒［2］、抗流行性出血性热病毒［3］、抗乙型肝炎病毒等［4］多种抗病毒药理作用。本实验室从空心莲子草中提取分离得到的生物碱类成分穆坪马兜铃酰胺具有明显的抗乙肝病毒药理活性(药理研究由武汉大学生命 科学 院病毒学 教育 部重点实验室协助完成),故对其进行含量分析研究,对今后评价及控制空心莲子草药材质量具有重要意义。 1 仪器与试药 Agilent 1100高效液相色谱仪（G1311A泵，G1316A紫外检测仪）；BP-211D型十万分之一分析天平；万分之一分析天平(METTLER TOLEDO AL204) 穆坪马兜铃酰胺（本实验室自制,HPLC法测定其纯度98％以上）供含量测定用；空心莲子草分别采自湖北、湖南、江苏、江西、福建5省，经湖北中医学院中药鉴定教研室吴和珍副教授鉴定为苋科莲子草属植物空心莲子草。 2 方法与结果 色谱条件色谱柱为Alltech alltima C18柱（250 mm× mm，5μm）；流动相为乙腈－水（25∶75）；流速 ml·min-1；检测波长220 nm；柱温30℃；进样量1～20 μl；理论塔板数应不低于5 000。见图1。 对照品溶液的制备 精密称取穆坪马兜铃酰胺对照品 mg，置25 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。 供试品溶液的制备 取空心莲子草粉末（过4号筛）10 g，精密称定置于锥形瓶中，加入甲醇溶液100 ml精密称重，浸渍1 h后，40℃超声提取提取30 min，室温静置20 min，再称定其重量，用甲醇溶液补足失重，摇匀，静置后滤过，取续滤液75ml置于蒸发皿中，水浴加热挥去甲醇，量取蒸馏水20 ml溶解，转移至分液漏斗中，先以石油醚萃取3次（50，50，40 ml），弃去石油醚液，水液再加入醋酸乙酯萃取3次（50，50，40 ml），弃去水液，合并醋酸乙酯液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，定容至 10 ml， μm微