番茄红素对寰枢椎失稳老年小鼠脑保护作用的研究临床医学.docVIP

番茄红素对寰枢椎失稳老年小鼠脑保护作用的研究临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：番茄红素对寰枢椎失稳老年小鼠脑保护作用的研究临床医学 1 1 材料与方法 2 2 结 果 3 3 讨 论 4 文2：寰枢椎椎弓根螺钉固定融合治疗寰枢关节失稳 5 1 资料与方法 5 2 结果 6 3 讨论 7 参考文摘引言： 8 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 10 正文 番茄红素对寰枢椎失稳老年小鼠脑保护作用的研究临床医学 文1：番茄红素对寰枢椎失稳老年小鼠脑保护作用的研究临床医学 番茄红素(Lycopene)又名茄红素，是类胡萝卜素的一种，广泛存在于红色蔬菜与水果中，因最早发现于番茄中而得名。国内外研究发现，Lycopene具有多种重要的生物学作用，如抗氧化、清除自由基、预防肿瘤及调节机体免疫功能、抗衰老等作用〔1〕。Lycopene是天然类胡萝卜素中最有效的单线态氧清除剂，其作用是目前常用抗氧化剂β2胡萝卜素的2倍、维生素E的100倍〔2〕。此外,Lycopene还可诱导某些内源性抗氧化酶，如超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)的活性〔3〕。本实验通过破坏颈椎周围韧带引起小鼠颈椎稳定性异常，导致小鼠记忆能力下降和脑组织损伤，观察番茄红素对脑组织损伤的康复 治疗 作用。 1 材料与方法 材料 10月龄ICR小鼠，体重(40±2)g，清洁级，由吉林大学实验动物中心提供;番茄红素(Lycopene)购于西安大恒制药有限责任公司;白细胞介素1β(IL1β)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素6(IL6)检测试剂盒购于上海卓康生物科技有限公司;免疫组化SABC染色试剂盒及淀粉样蛋白(Aβ)140抗体，购于武汉博士德生物有限公司。 方法 实验分组 10月龄ICR小鼠32只，雌雄各半，随机分为4组:正常对照组、模型组、Lycopene高、低剂量组,每组8只;5月龄ICR小鼠8只，雌雄各半，作为非老年对照组。 模型制备 除对照组，其余所有小鼠第1,2颈椎关节处注射30%乳酸溶液30 μl/次，1次/w，连续3 w〔4〕。首次造模24 h开始给药，Lycopene高、低剂量组分别以5和 mg/kg剂量灌胃，食用色拉油稀释，1次/d，连续给药100 d;对照组和模型组给予等体积色拉油，灌胃。 水迷宫实验 水迷宫由黑色有机玻璃板制成，水深18 cm，水温(23±1)℃，分成A、B、C、D区。终点区有一高出水平的安全平台。各区至终点区为一阶段训练，每一阶段训练3次。每次到达平台上休息30 s，再行下次实验。记录小鼠从起点A区游至终点台阶处的时间为游全程时间,其进入盲端次数为错误次数;24 h复测，作为记忆成绩，若动物120 s内未游到终点则以120 s 计算 〔5〕 脑组织TNFα、IL1β、IL6含量测定 末次给药次日断头处死小鼠，冰盘上迅速分离大脑，取一侧大脑制备组织匀浆，4℃、3 000 min离心15 min，取上清液置-30℃保存;采用酶联免疫分析法测定脑组织TNFα、IL1β、IL6含量，按照说明书进行。 免疫组化染色 按试剂盒说明书操作，采用SABC法，检测脑海马CA1区神经细胞异常结构蛋白Aβ140表达，光学显微镜下观察，细胞内见棕色颗粒者为阳性细胞。 统计学分析 采用软件进行单因素方差分析，数据用x±s表示。 2 结 果 水迷宫实验 与正常对照组相比，模型组游全程时间明显延长,错误次数显著增加(P);与模型组比较，Lycopene高剂量组错误次数也明显减少(P)，低剂量组游全程时间和错误次数无显著差异(P)，见表1。表1 小鼠的水迷宫实验检测结果正常对照组比较:1)P，与模型组比较:2)P 细胞因子检测结果 与正常对照组比较，模型组TNFα、IL1β和IL6含量升高(P，P，P);与模型组比较， Lycopene高剂量组小鼠脑组织TNFα、IL1β和IL6含量降低显著(P，P，P)，而Lycopene低剂量只有IL1β有统计学差异(P)，见表2。 Aβ免疫组化 正常对照组脑海马CA1区Aβ呈阴性表达，而模型组脑海马CA1区呈棕黄染色的阳性细胞随处可见，Lycopene组Aβ表达介于以上两组之间，高剂量组作用更为明显(图1)。表2 小鼠脑组织TNFα、IL1β、IL6含量检测结果 3 讨 论 本实验经寰枢椎关节周围注射30%乳酸，使颈椎周围韧带、筋膜以及肌肉等软组织受到化学刺激，呈现慢性炎症损伤，致使颈椎关节稳定性异常，导致颈椎关节渐进性微错位，压迫椎动脉、刺激交感神经，从而导致椎动脉血流减少，大脑处于应激、慢性缺血缺氧状态，