AAVhTGFβ1基因体内转染羊椎间盘对髓核细胞Ⅱ型胶原的影响医学（医学资料）.docVIP

AAVhTGFβ1基因体内转染羊椎间盘对髓核细胞Ⅱ型胶原的影响医学（医学资料） 文档信息 属性： F-01L7EZ，doc格式，正文29309字。质优实惠，欢迎下载！ 适用： 作为医学资料、医学资料写作的参考文献，解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容摘取等相关工作。 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：AAVhTGFβ1基因体内转染羊椎间盘对髓核细胞Ⅱ型胶原的影响医学 2 1 材料和方法 3 2 结 果 4 3 讨 论 4 文2：hIGF1基因转染促进退变椎间盘Ⅱ型胶原的表达医学 5 1 材料与方法 7 2 结 果 10 3 讨 论 11 参考文摘引言： 13 原创性声明（模板） 14 文章致谢（模板） 15 正文 AAVhTGFβ1基因体内转染羊椎间盘对髓核细胞Ⅱ型胶原的影响医学（医学资料） 文1：AAVhTGFβ1基因体内转染羊椎间盘对髓核细胞Ⅱ型胶原的影响医学 ［ABSTRACT］ObjectiveTo observe the effect of hTGFβ1 encoding gene mediated by adenoassociated virus (AAV) on the collagen Ⅱof the nucleus pulposus cells of intervertebral disc of two intervertebral discs from eight goats were evenly divided into two groups: group Ⅰ treated with AAVhTGFβ1 injection and group Ⅱ with mol/L PBS injection. Four weeks after treatment, immunohistochemistry staining and VIDAS analysis were applied to semiquantitatively analyze the expression of collagen Ⅱ.ResultsThe expression of collagenⅡin group Ⅰ was significantly stronger than that of group Ⅱ （t=,P).ConclusionTrafer of AAVhTGFβ1 into the intervertebral discs could enhance the expression of collagenⅡin the nucleus pulposus. ［KEY WORDS］traforming growth factor beta; collagen typeⅡ; intervertebral disk 腰椎间盘退变是腰背痛的重要病因，它是一个复杂的过程，其发生的病因和机制目前尚有较大争议。目前的治疗手段主要是对症治疗，包括保守治疗和手术治疗，前者常出现复发，而后者为有创治疗，会破坏脊柱的稳定性和完整性，伴有许多并发症[1]。随着分子生物学的迅速发展，基因治疗为我们在细胞、分子水平上延缓或逆转椎间盘退变提供了可能。基因治疗是将调解基因导入椎间盘细胞中，以期获得长期疗效。1997年WEHLING等[2]首先提出了转基因逆转椎间盘退变的设想，将目的基因转染体外培养的牛椎间盘软骨终板的软骨细胞。1999年NISHIDA等[3]证实，腺相关病毒介导的人转化生长因子β1(AAVhTGFβ1)基因可以成功导入兔椎间盘中，基因表达蛋白合成持续3个月未发现明显减少，转染的椎间盘较对照椎间盘合成hTGFβ1增多，蛋白多糖合成率增高。本研究采用AAVhTGFβ1体内转染羊椎间盘髓核细胞的方法，观察其对Ⅱ型胶原合成的生物学效应。 1 材料和方法 实验动物 健康成年SPF级山羊8只,由青岛大学医学院附属医院动物实验室提供，雌雄各4只，（±）月龄，平均体质量为（±）kg。随机分为两组，每组4只。在标准饲养条件下适应性饲养2周。AAVhTGFβ1由北京本元正阳基因技术有限公司提供。Collagen TypeⅡ抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司。 实验方法 术前禁饮食36～48 h，术前将阿托品～0. 05 mg/kg、氯胺酮10 mg/kg及地西泮10 mg肌肉注射，氯胺酮1～2 mg/kg静脉缓慢推注给药。山羊取右侧卧位，经腹膜后入路暴露腰椎间盘，任意选相连的4个椎间盘，实验组对应髓核用显微注射器各注射AAVhTGFβ1 50 μL，对照组对应髓核注 射磷酸盐缓冲液（PBS， mol/L）50