生化实验技术课程 学习指南.docVIP

生化实验技术课程学习指南 1．课程内容： 生命科学作为二十一世纪发展最为迅速的学科之一，生物化学技术则是其任何研究进展的技术支撑，是现代生物技术的重要组成部分。生化实验手段不仅推动了本学科的进展，而且被生物其他学科利用，促进了各学科的共同发展。生化实验技术的学习已经成为理解近代生命科学的重要基础之一。 本课程学习分基础实验与综合设计两个渐进式技能训练模块进行，其中基础实验内容主要学习生物化学的基本实验技术，包括验证与分析生化物质的6大主要类型（蛋白质、酶、DNA、糖、脂类、维生素等）和生化代谢过程的基本技术方法。内容涉及生化物质的定性、定量分析测定、电泳鉴定和代谢检测等，即课内完成8个实验项目的操作训练；同时鼓励学生自行设计实验内容，达到教学训练目标。 表1基础实验模块教学内容及技能点 教学模块 教学内容/实验项目 学时 知识点和技能点 课外拓展 基础实验总论 实验教学实施模式和要求介绍 1 介绍课程体系、课程内容概况、课程实施方式、实验要求及实验安全、网络教学平台的使用和流程等 性质分析 实验1 蛋白质的等电点测定和沉淀反应 3 缓冲液配制、蛋白离心、分离沉淀技术、蛋白质性质 生物样品中蛋白质分离、沉淀技术应用及分析 实验2 过氧化氢酶活力和动力学常数测定 4 溶液配制、标定、高锰酸钾滴定法、紫外分光度法检测酶活力及含量、酶学性质 过氧化氢酶生理意义及酶促反应动力学检测 定量测定 实验3 3,5-二硝基水杨酸比色法测定糖的含量 3.5 标准曲线绘制、样品处理、分光光度技术、数据处理、还原糖的检测原理 糖的分类，各总糖及还原糖检测技术方法应用 实验4 VC的定量测定 3.5 生化氧化还原知识、微量滴定技术 VC检测方法（紫外法）设计 电泳技术 实验5 DNA（RNA） 的琼脂糖凝胶电泳 3 缓冲液配制、平板电泳技术、核酸分子大小检测、核酸电泳原理 动植物核酸提取技术及检测 实验6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量 5 电泳缓冲液配制、垂直板电泳分离技术、蛋白质分子量检测技术、SDS电泳原理 蛋白质纯化、分析、鉴定 代谢研究 实验7 肌糖原的酵解作用 3.5 生物化学代谢反应知识点、化学检测技术 糖的代谢过程及意义 实验8 脂肪酸的β氧化 3.5 脂肪代谢过程、定性检测方法 脂肪的代谢途径及意义 研讨 总结实验成果和实验过程中出现的问题，失败和成功的原因，思考题的讨论等 2 锻炼学生总结、组织、表达、协作能力 自主设计项目 学生自行确定实验项目，自行设计实验方法，报实验指导教师审批，上交实验结果后，教师根据设计、实施和结果可以给予该课程的适度加分，对于选题、设计、结果都十分突出的项目，学生可以免除该课程的考试，直接获得优秀 培养学生进行实验设计的能力 综合设计实验模块内容为选取蛋白质、核酸两大类生化大分子物质提取制备和鉴定实验项目为载体，以生物化学理论为指导，设计综合贯穿生化分离检测实验的经典技术为主线的实验内容，学习生化材料预处理、沉淀技术、膜分离技术、层析技术（凝胶、离子交换、亲和析）、电泳技术、化学检测、光学检测等，以及生化产品分析鉴定的实验技术理论与操作方法。教学课时内完成2个大主题方向的实验内容，即蛋白质分离纯化鉴定、基因组提取纯化与PCR鉴定。学生可自选各方向一个实验项目设计方案并完成操作训练，也鼓励学生选择大纲外感兴趣的实验项目，如多糖、酶等大分子物质作为实验对象，同样设计并完成操作，达到教学要求的目标。 表2综合设计实验教学内容及技能、知识点 教学项目 教学内容 技能、知识点 实验课时 综合设计实验总论 《生化实验技术》（综合设计实验）学习流程、方法、网络实验管理系统使用、实验设计报告、论文书写格式掊训 自主、合作性学习方法掌握 课外 主题1： 基因组DNA的提取与PCR鉴定 1）核酸化学实验技术检测转基因食品的背景知识和关键技术点辅导，定性PCR法检测转基因食品项目实验 2）rDNA-ITS扩增法鉴定真菌种类的背景知识和关键技术点辅导，rDNA-ITS扩增法鉴定真菌种类项目实验 1）掌握核酸样品处理、提纯、PCR检测转基因等技术操作，并学会自主学习； 2）应用、科学思维的培养； 3）应用、创新思维，基础科研设计能力； 4）批判、创新思维能力、口头表达、行文书写、分析总结、语言组织、合作协调能力。 13 主题2： 蛋白质的分离纯化与鉴定 （1）猪血清免疫球蛋白的背景知识，分离纯化与鉴定的关键技术点辅导，猪血清免疫球蛋白的分离纯化与鉴定实验； （2）根霉菌植酸酶的背景知识，分离提取及酶活鉴定的关键技术点辅导，植酸酶的分离纯化鉴定及含量测定实验 掌握蛋白类大分子提取 分离、纯化鉴定知识与实验操作，培养学生自主学习能力； 应用、科学思维的培养；