浅谈五分类血细胞分析仪检测原理.pdfVIP

五分类血细胞分析仪检测原理 正常情况下、外周血中，有形血细胞主要包括： 红细胞、白细胞和血小板三大类。 白细胞正常情况下又份为：有粒白细胞（中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜 碱性粒细胞）和无粒细胞（淋巴细胞和单核细胞）。这样白细胞就一共分 出了五个类型，所以检测这白细胞的五个类型的相应血细胞分析仪就叫五 份类血细胞分仪。 下面先看看各五种白细胞在正常情况下的细胞大小、细胞质的多少、细胞 核的形状等物理结构。 细胞直径大 细胞质 细胞核 小 淋巴细胞 6-12微米 少、嗜碱性 大、圆 L 单核细胞 14-20微米 多、弱嗜碱 卵圆形、肾 M 性 形、马蹄形 或不规则形 嗜中性粒细 10-12微米 细小均匀的 杆状或分2- 胞N 嗜中性颗粒 5叶、以3叶 为主 嗜酸性粒细 12-15微米 大小一致、 常分2叶 胞E 分布均匀的 嗜酸性颗粒 嗜碱性粒细 10-12微米 大小不一、 不规则、呈 胞B 分布不均的 分叶状 S 嗜碱性颗粒 形 那么这五个类型的白细胞是根据什么原理来分类的呢？ 目前主要是根据细胞的如下几个特性来分类：细胞的大小、核浆比例、细 胞内细胞器的复杂程度、细胞核所含核酸的多少以及对某些化学试剂（或 / 和）荧光染液的敏感程度来区分之。 根据白细胞的以上特性，不同厂家、不同型号的五份类血细胞分析仪其检 测分析的原理是不同的。但其最基本的原理目前无非就以下几种情况： 1、利用这五类细胞对不同化学试剂（溶血剂或叫溶血素）的溶解性质不同 （如嗜酸细胞试剂和嗜碱细胞试剂）以及结合白细胞直方图细胞三分群的 库尔特（电阻抗法）检测原理将白细胞分为五类。 例如: 早期的 Abcus Junior5 仪器, （行业内常称为假五分类），当然比起三 分群的仪器分类精准了不少，但还是存在很大偏差，因为有些细胞是采用 大小分群（即脉冲的大小）和计算出来的。 2、四角度照射法： 90 °角区分分叶核细胞和单核细胞得到两类： 中性粒细胞和嗜酸性粒细胞（分叶核细胞）； 单核细胞和淋巴细胞及嗜碱性粒细胞（单核的嗜碱性粒细胞）。 用 90°偏振区分： 嗜酸性粒细胞和中性粒细胞。 用 0°和 10°通过核质比及细胞大小， 将嗜碱性粒细胞从淋巴和单核细胞 中群中分开。 用 0°根据大小区分单核细胞和淋巴细胞。 此类仪器以优利特生产的 URIT5160 五分类为代表。 3、细胞化学 -体积法：化学性溶血剂一方面作用于红细胞使红细胞破坏释 放血红蛋白，另一方面还作用于白细胞，使白细胞膜表面产生小孔，细胞 内浆质外溢，细胞失水皱缩，细胞膜紧贴于核上。测定时细胞的体积大小 是核、颗粒和膜成分的总和，白细胞种类不同、分化程度不同所含的胞浆 颗粒、核结构以及大小也不同。运用 V.C.S 三种探针，在流式通道的某一位 点，对通过的单列白细胞，进行逐个的、同时的、三重的检测，以及三维 分析，以确定其亚群性质。 V-低频波（Volume ）: 采用低频电流准确分析细胞体积； C-高频波(Conductivity): 采样高频电流分析细胞核型； S-激 光（Scatter ）: 该激光束可穿透细胞，探测细胞内核分叶 状况和胞浆中颗粒情况，分析细胞的颗粒特性。 此类仪器以贝克曼库尔特为代表的 LH750 4、利用半导体激光散射和核酸荧光染色技术 前向散射光：检测细胞的大小； 侧向散射光：检测细胞内细胞内容物的复杂程度； 侧向荧光： 检测细胞核酸的多少。 利用这三个参数将白细胞分为五类。 此设备原理是目前较为流行的测量方法，以 SYSMEX 的五份类为代表，代 表机型有 XN 等系列。 以上这些分类方法还都在围绕细胞的物