2735例女性下生殖道HPV感染检测结果分析(临床医学资料).docVIP

2735例女性下生殖道HPV感染检测结果分析(临床医学资料).doc

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2735例女性下生殖道HPV感染检测结果分析(临床医学资料) 文档信息 属性: F-01NWKX,doc格式,正文15242字。质优实惠,欢迎下载! 适用: 作为医学资料、临床医学资料写作的参考文献,解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容摘取等相关工作。 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1:2735例女性下生殖道HPV感染检测结果分析 2 1 材料和方法 2 2 结果 3 3 讨论 4 文2:女性生殖道多种病原体感染检测结果分析 6 1 资料与方法 6 2 结果 7 3 讨论 8 参考文摘引言: 10 原创性声明(模板) 11 文章致谢(模板) 11 正文 2735例女性下生殖道HPV感染检测结果分析(临床医学资料) 文1:2735例女性下生殖道HPV感染检测结果分析 人乳头瘤病毒(HPV)是一种小的DNA双链病毒,可以特异性地感染人皮肤和黏膜的鳞状上皮细胞,引起多种良、恶性病变。在HPV感染导致的疾病中,最常见的就是尖锐湿疣和宫颈癌。根据感染的致癌性与否又可分为高危亚型和低危亚型。HPV的致病性与其亚型有关,如低危亚型感染仅诱发生殖器疣样病变,高危亚型感染是导致宫颈癌发生最主要的原因。为了解本地区女性HPV的感染情况和型别分布,我们对2008年1-12月来我院就诊的2 735例的女性下生殖道标本进行了HPV基因分型检测,报告如下。 1 材料和方法 材料 一般资料:病例来源于本院妇产科门诊就诊、自愿接受生殖道HPV感染筛查的有性生活妇女,选取2 735例有宫颈炎症或宫颈糜烂等临床指征的病例做HPV检测。年龄16~70岁,平均年龄(±)岁。从年龄≤20岁开始,以10岁为一年龄段,到≥60岁,分为6个年龄组。 标本采集及保存方法:用窥阴器暴露宫颈,拭去宫颈口黏液,将宫颈刷置于宫颈口,轻轻搓动宫颈刷使其顺时针方向旋转5周。慢慢取出宫颈刷。将其放入标有患者编号的取样管内,取样管中已加有专用细胞保存液,拧紧瓶盖。标本在室温保存放置不超过2 h,4 ℃保存不超过24 h, -20 ℃保存不超过3个月。样本应避免反复冻融。 试剂及仪器:HPV分型基因芯片检测系统;HbriMax医用核酸分子快速杂交仪和HPV扩增分型检测试剂盒(凯普生物化学有限公司,上海);PE5700基因扩增仪(PE公司,美国);DNA提取试剂盒(达安公司) 方法 样本处理:将装有样本的微量离心管,以14 000 min速度离心5 min,弃上清,保留管底沉淀物,加入50μL裂解液悬浮沉淀,100 ℃加热10 min,以14 000 min速度离心10 min,取上清液按DNA提取试剂盒步骤操作。 PCR扩增:取PCR反应管1支,在管壁上做好标记,分别加入已提取的待测样品DNA 1μL,反应总体系25μL,每次实验必须设置一个阴性对照及阳性对照,处理方法同标本。PCR反应条件为20℃ 10 min,95 ℃ 9 min,尔后循环40次(95 ℃,20 s;55 ℃,30 s;72 ℃,30 s);72 ℃延伸5 min。 杂交及显色:将PCR产物20μL在95 ℃加热5 min,然后冰水浴至少2 min;让杂交仪预热45 ℃,在杂交孔内放好膜芯片,用1 mL杂交液预处理分子膜;将产物20μL加入杂交液(45 ℃)混匀。加在分子膜上温育10 min,排泵,杂交液冲洗膜3次,设定温度25 ℃,用 mL的封阻液封闭5 min,排泵,加入 mL酶标液,温育4 min;设置温度36 ℃,用溶液a洗膜4次,加入 mL NBT/BCIP显色液3 min,用溶液b洗膜4次,观察结果。当对照膜条PC点出现BIOTIN点和IC 点蓝色斑点时提示PCR、杂交、显色等各个环节操作正常,此时结果真实有效。 2 结果 HPV感染的型别分布 在2 735例样本中检出HPV DNA阳性病例1 059例,阳性检出率为%,检出高危基因型(HPV16/18/31/33/35/39/45/51/52/56/58/68型)857例,阳性率为%;检出低危型(HPV6/11/42/43/44型)244例,阳性率为%;检出常见亚性(HPV53/66/cp804)177例,阳性率为%。HPV各亚型检出情况见表1。在1 059例HPVDNA阳性感染者中检出率较高的HPV高危型有HPV16型,HPV52型,HPV58型,低危型HPV6型,HPV11型。其中检测过程中发现有多重型感染患者,在检出类型中单一型感染率为%(623/2 735),混合型感染率为%(436/2 735),最多出现达6种型别混合感染,见表2。 HPV感染的年龄分布 各年龄段HPV感染检出率见表3。HPV感染率在30~40岁年龄段达高峰,5

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