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仪器分析教学课件色谱法基本理论 * 第一页，共30页 一、塔板理论（一）分配过程1. 分配系数（ partion factor） K 组分在固定相和流动相间发生的吸附、脱附，或溶解、挥发的过程叫做分配过程。在一定温度下，组分在两相间分配达到平衡时的浓度（单位：g / mL）比，称为分配系数，用K 表示，即： 分配系数是色谱分离的依据。 * 第二页，共30页 分配系数 K 的讨论 一定温度下，组分的分配系数K越大，出峰越慢； 试样一定时，K主要取决于固定相性质； 同一个组份在不同的固定相上的分配系数K不同； 选择适宜的固定相可改善分离效果； 试样中的各组分具有不同的K值是分离的基础； 某组分的K = 0时，即不被固定相保留，最先流出。 * 第三页，共30页 2.分配比 （partion ratio）k 在实际工作中，也常用分配比来表征色谱分配平衡过程。分配比是指，在一定温度下，组分在两相间分配达到平衡时的质量比： 1. 分配系数与分配比都是与组分及固定相的热力学性质有关的常数，随分离柱温度、柱压的改变而变化。 2.分配系数与分配比都是衡量色谱柱对组分保留能力的参数，数值越大，该组分的保留时间越长。 3. 分配比可以由实验测得。 分配比也称： 容量因子(capacity factor)；容量比(capacity factor)； * 第四页，共30页 （1）容量因子与分配系数的关系 式中β为相比，即β=Vm/Vs 。 填充柱相比：6～35；毛细管柱的相比：50～1500。 容量因子越大，保留时间越长。 VM为流动相体积，即柱内固定相颗粒间的空隙体积； VS为固定相体积，对不同类型色谱柱， VS的含义不同: 气-液色谱柱： VS为固定液体积； 气-固色谱柱： VS为吸附剂表面容量； * 第五页，共30页 （2） 分配比与保留时间的关系 某组分的k值可由实验测得，等于该组分的调整保留时间与死时间的比值： （3）分配系数K及分配比k与选择因子r2,1的关系 如果两组分的K或k值相等，则r2,1=1，两组分的色谱峰必将重合，说明分不开。两组分的K或k值相差越大，则分离得越好。因此两组分具有不同的分配系数是色谱分离的先决条件。 * 第六页，共30页 基本保留方程可表示为： tR = t0(1+k) 若载气流量F0恒定，也可用保留体积表示，则 VR=Vm+KVs 这就是色谱基本保留方程。 上式说明，色谱柱确定后，Vm和Vs即为定值。由此可见，分配系数不同的各组分具有不同的保留值，因而在色谱图上有不同位置的色谱峰。 （4）基本保留方程 * 第七页，共30页 例：用一根固定相的体积为0.148mL，流动相的体积为1.26mL的色谱柱分离A,B两个组分，它们的保留时间分别为14.4min，15.4min，不被保留组分的保留时间为4.2min，试计算：（1）各组分的容量因子（2）各组分的分配系数（3）AB两组分的选择因子rB,A 解：（1）kA=(14.4min-4.2min)/4.2min=2.43 kB=(15.4min-4.2min)/4.2min=2.67 K=kβ=kVm/Vs KA=kAVm/Vs=2.43×1.26mL/0.148mL=20.7 KB=kBVm/Vs=2.67×1.26mL/0.148mL=22.7 (3) rB,A=KB/KA=22.7/20.7=1.10 * 第八页，共30页 色谱理论 色谱理论需要解决的问题：色谱分离过程的热力学和动力学问题。影响分离及柱效的因素与提高柱效的途径，柱效与分离度的评价指标及其关系。 组分保留时间为何不同？色谱峰为何变宽？ 组分保留时间：色谱过程的热力学因素控制； （组分和固定相的结构和性质,如分配系数） 色谱峰变宽：色谱过程的动力学因素控制； （两相中的运动阻力，扩散） 两种色谱理论：塔板理论和速率理论； * 第九页，共30页 塔板理论的假设： (1) 在每一个平衡过程间隔内，平衡可以迅速达到；这一小段间隔的柱长称为理论塔板高度。 (2) 将载气看作成脉动（间歇）过程； (3) 试样沿色谱柱方向的扩散可忽略； (4) 每次分配的分配系数相同。 （二）塔板理论-柱分离效能指标 1.塔板理论（plate theory） 半经验理论；