具有神经氨酸酶抑制作用的SEK15类聚酮化合物及其制备方法和应用发明专利.docxVIP

具有神经氨酸酶抑制作用的SEK15类聚酮化合物及其制备方法和应用 技术领域 本发明涉及利用链霉菌次级代谢产物制备活性化合物技术领域，具体涉及一类具有神经氨酸酶抑制作用的SEK15类聚酮化合物及其制备方法和应用。 背景技术 流感是由流感病毒引起的一种严重威胁人类健康的急性病毒性呼吸道传染病，而且感染后的症状主要是表现高烧咳嗽，伴有肺炎等症状。虽然已知的流感病毒已经得到控制，但是，由于流感病毒的抗原变异能力极强且相当频繁，疫苗的研制和生产相对滞后，对于易感人群的保护率不高，因此，新的流感大流行随时都有可能爆发。在这种情况下，寻找具有预防和治疗作用的抗流感药物就显得尤为重要和紧迫。 控制流感的主要手段是应用解热、镇痛及止咳药进行对症治疗，或接种灭活疫苗进行预防。目前用于临床治疗流感病毒有效的药物主要有M?2离子通道阻滞剂和神经氨酸酶抑制剂两大类。金刚烷胺和金刚乙胺类药物通过阻断流感病毒M?2离子通道蛋白起来防治流感，但是长期服用此类药物存在神经毒性、耐药毒等不良反应。目前，流感病毒神经氨酸酶抑制剂是已成为抗流感药物中重要的组成之一。此类药物对高致病性流感病毒流感具有明显的抑制作用且不易引起抗药性，是目前抗病毒感染药物开发的研究热点。 流感病毒神经氨酸酶(NA)又称唾液酸酶是分布于流感病毒被膜上的一种糖蛋白，它具有抗原性，可以催化唾液酸水解，协助成熟流感病毒脱离宿主细胞感染新的细胞，对流感病毒的复制有重要作用。在每个流感病毒的表面，大约有100个蘑菇形四聚体糖蛋白分子。流感病毒神经氨酸酶蛋白的晶体结构已确定，它是由相同亚基组成的四聚体。酶活性位点位于各亚基表面的一个口袋中，在已经鉴定的流感病毒中均高度保守。自从1983年确定了流感病毒神经氨酸酶的晶体结构与天然底物唾液酸的共晶结构以来，流感病毒神经氨酸酶抑制剂的研究，尤其是唾液酸类似物的研究取得了突破性进展。在晶体结构的基础上，人们对分子模拟进行了研究，进而研发了高效、选择性抑制剂。截止目前，仅有扎那米韦和达菲两种治疗流感病毒的神经氨酸酶(NA)抑制剂在美国获准上市。 从天然资源中寻找新的抗流感药物成为研究的趋势，其中放线菌由于特殊的生存环境，有可能产生结构新颖、作用机制独特的活性次级代谢产物。因此从放线菌中寻找活性成分来预防和治疗流感，越来越引起人们的重视。链霉菌属，是放线菌中最大的一个属，因它们能产生丰富的且具有一定生物活性作用的次级代谢物而受到广泛关注。 发明内容 针对本领域存在的不足之处，本发明提供了一类具有神经氨酸酶抑制作用的SEK15类聚酮化合物，均可从链霉菌中提取得到，可用于制备神经氨酸酶抑制剂以及治疗流感病毒引起的流感的药物。 一类具有神经氨酸酶抑制作用的SEK15类聚酮化合物，结构式分别如下式(I)、(II)、(III)所示： 式(I)、(II)所示的化合物为首次将式(III)的SEK15结构母核加成形成的二聚体，结构新颖，相较于式(III)的SEK15的结构母核均已经有了显著变化。 本发明还提供了结构式分别如式(I)～(III)所示的上述具有神经氨酸酶抑制作用的SEK15类聚酮化合物的制备方法，包括步骤： (A)将链霉菌活化后接种于高氏一号液体培养基中，摇床恒温震荡培养，获得发酵液；所述链霉菌为Streptomyces sp.CICC 41038，来源于中国工业微生物菌种保藏管理中心； (B)将所述发酵液经有机溶剂萃取后获得有机萃取液； (C)将所述有机萃取液浓缩后，经分离纯化获得如式(I)～(III)所示具有神经氨酸酶抑制作用的SEK15类聚酮化合物。 作为优选，步骤(A)中，所述链霉菌活化的过程包括： 将所述链霉菌接种到高氏一号琼脂固体培养基上，于26～32℃恒温培养箱中静置，活化培养3～5天； 所述高氏一号琼脂固体培养基的配制包括： 将可溶性淀粉、硝酸钾、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸亚铁、琼脂、海盐与水混合均匀，再调节pH值至7.0～7.2。 作为优选，步骤(A)中： 所述高氏一号液体培养基的配制包括： 将可溶性淀粉、硝酸钾、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸亚铁、海盐与水混合均匀，再调节pH值至7.0～7.2； 所述摇床恒温震荡培养的条件为：26～32℃下，180～220rpm摇床中培养6～12天。 作为优选，步骤(B)中，所述有机溶剂为乙酸乙酯，经乙酸乙酯萃取后得到的即为乙酸乙酯萃取液。 作为优选，步骤(C)中： 所述浓缩，具体为： 将有机萃取液经真空干燥除去溶剂； 所述分离纯化，具体为： (a)浓缩后产物采用反相柱色谱分离，用体积比为1:9至1:0的甲醇-水体系进行梯度洗脱，收集含有目标化合物的馏分并合并； (b)将步骤(a)所得馏分采用凝胶柱色谱分离纯化，收集含有目标化合物的馏分并合并； (c)将步骤(b)所得馏分采用反相高效液相色谱分离纯化，分别得到如式(I)～(