次生代谢产物.pptxVIP

会计学;植物次生代谢产物的概述 研究现状 植物细胞大规模培养生产次生代谢产物的基本程序 提高次生代谢物生产效率的途径与方法 应用实例 前景展望;概述;次生代谢过程被认为是植物在长期进化中对生态环境适应的结果，它在处理植物与生态环境的关系中充当着重要的角色。许多植物在受到病原微生物的侵染后，产生并大量积累次生代谢产物，以增强自身的免疫力和抵抗力。 植物次生代谢途径是高度分支的途径，这些途径在植物体内或细胞中并不全部开放，而是定位于某一器官、组织、细胞或???胞器中并受到独立的调控。;植物次生产物种类繁多（据保守估计已超过2万种），根据分子结构不同大致分为：;植物次生代谢产物在医药、食品、轻化工业等领域具有重要意义：;然而;研究现状;来自于植物体和细胞培养的紫草宁含量比较;Examples of enhancement in natural product yield in selected cell lines compare with parentplant material. (After Fowler, 1983);植物次生代谢产品的市场潜能;规模化细胞培养是生产植物次生产物的理想途径：;植物细胞大规模培养生产次生代谢产物的基本程序：;Stages in the development and operation of a plant cell biotechnology process;次生代谢产物的提取、纯化与测定;植物细胞培养进行有效成分的生产发展到现在,已经取得令人瞩目的成就。 然而在植物细胞培养过程中普遍存在的细胞系不稳定、细胞生长缓慢、不耐剪切力及代谢物产量低等问题又成为其实现规模化生产的瓶颈。在目前已经研究过的植物中，仅有 1/5左右种类的培养物中目的产物的含量接近或超过原植物，多数情况下培养细胞合成某些次生代谢物的能力下降甚至消失。;因此充分利用基因工程的手段，筛选高产细胞系，深入研究特定代谢产物的生物合成途径，对培养条件进行优化，研究和开发适合植物细胞培养的生物反应器是解决这些问题的根本途径。 ;提高次生代谢产物生产效率的途径和方法：;外植体的选择;筛选得到高产细胞系（株）;筛选植物高产细胞系常用的方法有目视法、放射免疫法(RIA)、酶联免疫法(ELISA)、高效液相色谱法(HPLC)等。目前国外还采用一种突变种筛选法，其原理是把一些细胞毒性抑制剂如P-氟苯丙氨酸(PFP)、5-甲基色氨酸、草苷磷、维生素H等加入到要筛选的细胞培养体系中，那些耐药性强且经过一段时间培养生长正常的细胞系就可能是所要求的高产细胞系。 ;合适的培养条件;pH：培养基的pH值与细胞生长繁殖以及次生代谢产物的生产关系密切，与培养温度相似，细胞的生长繁殖与次生代谢产物合成时所需的pH值通常并不一致，需要在不同的阶段控制不同的pH值。 电场：膜周电泳学说认为对细胞施加稳定的电场能够导致膜中带电物质的重新分配，最终导致原生质体生长和分化效应。 磁场：加速了细胞内的氧化磷酸化过程，从而促进ATP的合成，最终使得有丝分裂指数增高。 超声波：有利于细胞次生代谢物向细胞外释放。 ;化学因素： 合理的培养基组分：培养基中的碳源、氮源及其一些微量的金属离子以及一些有机物质不仅是细胞生长以及合成的物质基础，而且很多都能够促进细胞生长或者是有利于产物的形成。 一般情况下，增加N、P、K的含量会使细胞的生长加快，增加蔗糖含量可以增加细胞培养物的次生代谢产物的量。 还有生长调节物质也是次生代谢产物积累的关键因素。不同种类及不同浓度的生长素和细胞分裂素以及二类激素的不同比例显著的影响着细胞的生长和目的产物的合成。 2，4-D，细胞分裂素，KT，GA，脱落酸等。 ;溶氧：在植物细胞悬浮培养中，溶氧对细胞的生长和代谢有很大的影响，同时，在培养条件中溶氧也是最复杂的因素之一，溶氧有一定的极限，过高或过低都会影响到细胞生长和产物合成，特别是在高密度培养时，供氧不足往往可能是限制产量的主要因素之一，因此溶氧参数的调控对于植物细胞培养十分关键。;前体饲喂：前体是指处于目的代谢物代谢途径上游的物质。植物体内合成代谢处于代谢的众多分支之中，因此前体化合物的供给不足和信号诱导的缺乏会严重影响次生代谢产物的积累。通过前体饲喂细胞，一方面可以通过增加底物量来加快反应速率和提高产率，另一方面还能够反馈抑制分支路径而促进反应顺利进行。 然而，许多外源前体的加入有时又会抑制植物细胞的生长，最终影响了次生代谢物的产量， 因此就许多前体而言，存在一个前体的最佳添加浓度；类似于前体的最佳添加浓度，前体也有最佳添加时间，当外源前体在这个时间加入，培养物的次生代谢物的产量要高于在其它时间 加入时的产量。 ;诱导子的应用;在植物细胞培养中应用的诱导子包括 生物诱导子（指来源于生物体的化合