茶叶生物技术PPT课件（共7单元）07第五章基因工程-第七章茶树蛋白质组学.pptVIP

* * * * * 多糖荚膜 * Figure: 07-01 Synthesis of the three types of informational macromolecules. Note that in any particular region, only one of the two strands of the DNA double helix is transcribed. * Fig 10.20 Direct contact between two conjugating bacteria is first made via a pilus. The cells are then drawn together to form a mating pair for the actual transfer of DNA. This occurs by retraction (depolymerization) of the pilus within the donor cell. Notes the F-specific bacteriophages on the pilus. * * * “基因组学和蛋白质组学告诉你什么可能会发生，而代谢组学则告诉你什么确实发生了。”（Bill Lasley, UC Davis） * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 基本原理 五、质谱分析 质谱分析法（MS）是指在一定条件下，将样品分子电离成离子，然后通过测定这些离子的质荷比（m/z）和强度来进行定性和定量的一种分析方法 质谱分析法的过程为：将样品气化并电离成带电离子，然后通过一定方法将不同m/z的离子分开，并测定其强度，绘出质谱图，对质谱图进行分析可得到关于样品分子结构和定量方面的信息 * * 完整的现代质谱仪由进样系统、离子源、质量分析器、离子检测器、数据处理及控制系统五部分组成，此外还有一个保持质谱仪高真空度的真空系统。离子源和质量分析器是质谱仪最重要的两个部件，也是不同质谱仪的主要差别所在。电喷雾质谱（ESI）和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI）为离子源的质谱技术已广泛应用于生物大分子研究，是蛋白质组学研究中不可或缺的分析工具，因此被称为生物质谱（BMS） 进样 系统 离子源 质量 分析器 检测器 数据采集 及分析 真空系统 质谱仪模块组成 * * 真空系统 质谱仪的离子源、质量分析器和检测器必须在高真空状态下工作，以减少本底的干扰，避免发生不必要的离子-分子反应。所以质谱反应属于单分子分解反应。利用这个特点，我们用液质联用的软电离方式可以得到化合物的准分子离子，从而得到分子量。 由机械真空泵(前极低真空泵)，扩散泵或分子泵(高真空泵)组成真空机组，抽取离子源和分析器部分的真空。 只有在足够高的真空下，离子才能从离子源到达接收器，真空度不够则灵敏度低。 进样 系统 离子源 质量 分析器 检测器 数据采集 及分析 真空系统 * * 在不破坏真空度的情况下，使样品进入离子源。 气体可通过储气器进入离子源。 易挥发的液体，在进样系统内汽化后进入离子源。 难挥发的液体或固体样品，通过探针直接插入离子源。 进样系统 * * M + e M +. + 2e M -. 小于1% M +. A +. + + B + C D + +. 中性分子或碎片 R? . 50-70eV 分子失去电子，生成带正电荷的分子离子 分子离子可进一步裂解，生成质量更小的碎片离子 离子源 * * 离子源（Ion source） 质谱仪的离子源种类主要有： 电子电离(Electron Ionization EI) 化学电离(Chemical Ionization , CI ) 快原子轰击（Fast Atomic bombardment, FAB） 电喷雾(Electron spray Ionization，ESI) 大气压化学电离(Atmospheric pressure chemical Ionization, APCI) 大气压光学电离（ Atmospheric pressure photoionization, APPI） 基质辅助激光解吸电离（ MALDI ） * * 电喷雾质谱技术和基质辅助激光解吸附质谱技术是诞生于80年代末期的两项电离技术。这两项技术的出现使传统的主要用于小分子物质研究的质谱技术发生了革命性的变革。 具有高灵敏度和高质量检测范围，使得在pmol的水平上准确地分析分子量高达几万到几十万的生物大分子成为可能