无菌环境和操作要求.pptVIP

S4 染色试验 本测试为评估COP效能所用，验证系统对正压罩内设备表面的清洗效果，从而确认COP是否存在清洗死角，从而及时调整喷嘴位置，也为贴片试验做好准备 S5 贴片试验 本测试为评估SOP效能所用, 验证系统对正压罩内设备表面的杀菌效果，从而确认正压罩无菌环境的建立状况以及是否存在死角 S6 瓶内、外挑战测试 本测试是为验证瓶杀菌系统对瓶内杀菌的能力 S7 盖内、外挑战测试 本测试是为验证盖杀菌系统对瓶盖内的杀菌能力 S8 灌水试验 验证系统连续生产的能力，并验证UHT、无菌罐、充填系统的无菌状况，为后续培养基验证做好准备 S9 培养基测试 一 a、验证设备年度保养后的无菌状况，是否具备生产中性产品的能力 b、验证新瓶型、新盖型上机的适应性，是否具备可生产条件 c、新线UHT、无菌罐、充填系统的预测试 S10 培养基测试 二 判定新安装无菌线是否具备可持续生产的能力 S11 培养基测试 三 a、验证系统运行中无菌环境被破坏后，经过SOP后系统是否能继续维持生产状态 b、验证无菌罐无菌性最大维持时间 S12 成品测试 证明无菌生产线是具备商业生产的能力 步骤及内容 新装生产线 生产线的迁移 新瓶型 新盖型 年度保养/大修 S0前提条件 √ √ S1辅助系统 √ √ S2烟雾测试 √ √ S3环境预测试 √ √ S4染色试验 √ √ √ S5贴片测试 √ √ S6瓶内外挑战测试 √ √ √ S7盖内外挑战测试 √ √ √ S8灌水测试 √ √ S9培养基测试 一 √ √ √ √ √ S10培养基测试 二 √ √ S11培养基测试 三 √ √ S12成品测试 √ √ √ 无菌线各阶段测试方案 Thanks for Your Kind Attention The End 附件为无菌验证各试验方法详解，大家有兴趣可以了解一下！ a. 产品UHT及无菌水UHT、无菌罐和一体机的SIP/生产 程序验证，包括实际温度（温度试纸）、时间的检测，以及最低温度的预警程序，到达下限系统是否能够自 动报警并停机 b. 瓶杀菌机喷嘴喷射压力、洗瓶机无菌水喷射压力自动检测效果及压力预警程序 c. 各蒸汽障的温度预警程序，低于最低值系统是否失去无菌 d. 杀菌剂的浓度、温度、流量预警程序，低于下限系统是否自动停机 S0 前提条件 S1辅助系统测试（无菌水、无菌空气及氮气的微生物状况） 系统在正常的CIP/SIP后对无菌水、无菌空气/氮气的总取样口以及各使用点终端取样口取样进行微生物分析，各点无菌水取样量至少1L，各点无菌空气/氮气取样时间至少30min S2烟雾测试 系统分别在生产、待机、清洗三种模式下 用烟雾发生器在压力最高区域（充填区）发散烟雾，正压罩各区压力控制按照供应商提供说明书上压力设定值的下限 S3正压罩环境预测试 经过正常的COP/CIP/SOP/SIP后，对空间进行落菌、浮游菌采集、涂抹、尘埃粒子的检测 落菌：每个区域≥2个点，时间≥30min； 浮游菌：每个区域≥1个点，时间≥30min； 涂抹：每个区域≥5个点，每个棉签涂抹面积≥1dm2如涂抹充填头、洗瓶头或杀菌喷嘴每个棉签≥5个喷嘴或充填/洗瓶头； 尘埃粒子：每个区域≥1个点且要对每个风机进行检漏 S4染色试验 1、称取0.54g罗丹明用100ml异丙醇溶解 2、称取1.8g果胶+100g白砂糖+300ml80℃的热水充分溶解 3、称取24g橙浓缩汁+100ml水中充分溶解 4、将上述3种液体混合用喷壶喷洒在正压罩内任意区域 5、喷洒后静止30min左右（具体时间看溶液是否已粘附在设备表面） 6、启动COP程序 S5贴片试验 1、准备钢片100片，钢片粗糙度的选择尽量接近设备表面的粗糙度 2、用枯草芽孢杆菌接种钢片：105和106各50片 (接种量10μl-100μl) 3、钢片正常风干后，准备进行测试，先进行低浓度后进行高浓度试验 4、基于无菌室/洁净室的尺寸,在其无菌区域确定至少30个对于系统灭菌重要的位置,即那些可能导致瓶盖、铝片、瓶子和产品污染的位置（可参考染色试验的结果）,和在清洁和杀菌时绝对有必要灭菌的位置,例如:冲洗阀、灌注阀、下盖槽和机星轮等装置的表面. 5、在一张灌装无菌区的图纸上将上述位置标出并标号.并将钢片编号和图纸一一对应，然后进行钢片的悬挂 6、在悬挂钢片前在50片钢片中随机抽取5片钢片进行阳性对照，其方法为：将钢片取回后分别放入5个已灭菌好的装有100ml无菌水的盒子里进行充分振荡，并进行梯度稀释，至少稀释5个梯度，分别进行膜过滤，培养后计数从而得到钢片的初始带菌量 7、钢片悬挂后，根据供应商所提供说明书用清洗灭菌条件