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一、仪器主要部件 现在二十八页，总共五十二页。 1.高压电源 （1）0～30 kV 稳定、连续可调的直流电源； （2）具有恒压、恒流、恒功率输出； （3）电场强度程序控制系统； （4）电压稳定性：0.1 %； （5）电源极性易转换； 现在二十九页，总共五十二页。 2. 毛细管 毛细管是CE分离的心脏。理想的毛细管必须是电绝缘、紫外/可见光透明且富有弹性的，目前可以使用的有玻璃、熔融石英或聚四氟乙烯塑料等。毛细管内径一般为20～100μm。 现在三十页，总共五十二页。 现在三十一页，总共五十二页。 3.缓冲液池 化学惰性，机械稳定性好； 4.检测器 要求：具有极高灵敏度，可柱端检测； 检测器、数据采集与计算机数据处理一体化； 类型 检测限/mol 特点 紫外-可见 10-13～10-15 加二极管阵列，光谱信息 荧光 10-15～10-17 灵敏度高，样品需衍生 激光诱导荧光 10-18～10-20 灵敏度极高，样品需衍生 电导 10-18～10-19 离子灵敏，需专用的装置； 现在三十二页，总共五十二页。 二、毛细管电泳的进样方式 进样量：毛细管长度的1%-2%；纳升级、非常小； 1.流体力学进样方式 （1）进样端加压 （2）出口端抽真空 （3）虹吸进样 现在三十三页，总共五十二页。 毛细管一端插入样品瓶，加电压； 2.电动进样方式 进样不均：电歧视现象，淌度大的离子比淌度大的进样量大； 离子丢失：淌度大且与电渗流方向相反的离子可能进不去； 特别适合黏度大的试样。 3. 扩散进样 试样通过扩散作用进入分离柱端口处。 现在三十四页，总共五十二页。 第四节 毛细管电泳类型 常用的六种电泳分离模式； 根据试样性质不同，采用不同的分离类型； 每种机理的选择性不同； 现在三十五页，总共五十二页。 一、毛细管区带电泳（Capillary zone electrophoresis , CZE） 带电粒子的迁移速度=电泳和电渗流速度的矢量和。 正离子：两种效应的运动方向一致，在负极最先流出； 中性粒子：无电泳现象，受电渗流影响，在阳离子后流出； 阴离子：两种效应的运动方向相反；ν电渗流 ν电泳时,阴离子在负极最后流出,在这种情况下,不但可以按类分离,同种类离子由于差速迁移被相互分离。 CZE是最基本、应用广的分离模式； 现在三十六页，总共五十二页。 二、毛细管凝胶电泳 Capillary gel electrophoresis ，CGE 将聚丙烯酰胺等在毛细管柱内交联生成凝胶。 其具有多孔性，类似分子筛的作用，试样分子按大小分离。能够有效减小组分扩散，所得峰型尖锐，分离效率高。 蛋白质、DNA等的电荷/质量比与分子大小无关，CZE模式很难分离，采用CGE能获得良好分离，DNA排序的重要手段。 特点：抗对流性好，散热性好，分离度极高。 无胶筛分技术：采用低粘度的线性聚合物溶液代替高粘度交联聚丙烯酰胺。柱便宜、易制备。 现在三十七页，总共五十二页。 毛细管电泳法 现在一页，总共五十二页。 第一节 毛细管电泳概述 第二节 毛细管电泳基础理论 第三节 毛细管电泳仪 第四节 毛细管电泳类型 第五节 毛细管电泳的应用和进展 现在二页，总共五十二页。 第一节 毛细管电泳概述 毛细管电泳（CE），又称高效毛细管电泳，是近年来发展最快的高效分离分析技术之一。该技术是现代微柱分离技术和经典电泳技术结合的产物，是气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)等常用分离技术的重要补充，在诸多研究领域得到了人们广泛的接受和认可。 现在三页，总共五十二页。 一、毛细管电泳发展历程 1808年，俄国物理学家 Pence 发现电泳现象。 1937年，瑞典Tiselius将蛋白质混合液放在两段缓冲溶液之间，两端施以电压进行自由溶液电泳，发现样品的迁移速度和方向由其电荷和淌度决定,第一次从人血清提取的蛋白质混合液中分离出白蛋白和α、β、γ球蛋白，但分离效率低； 1981年，Jorgenson在75μm毛细管内施加300 V/cm的高强度电场，获得了理论塔板数超过400,000 plates/m的高分离效率，轰动了整个分离界，成为CE划时代里程碑 1989年，毛细管电泳仪问世。 1989年，第一届CE国际会议的召开，标志着一门新的分析技术的产生。 现在四页，总共五十二页。 二、毛细管电泳的特点 (1)高效：每米理论塔扳数低则十几万，高则几百万甚至上千万； (2)快速：可在十几分