MMP9基因多态性与老年动脉僵硬度的相关性研究.docVIP

MMP9基因多态性与老年动脉僵硬度的相关性研究 文档信息 属性： Doc-029GJL，doc格式，正文8695字。质优实惠，欢迎下载！ 适用： 作为文章写作的参考文献，解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容摘取等相关工作。 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：MMP9基因多态性与老年动脉僵硬度的相关性研究 1 1 研究对象与方法 2 2 结 果 3 3 讨 论 4 文2：MMP9基因多态性与老年动脉僵硬度的相关性研究 6 1 研究对象与方法 7 2 结 果 8 3 讨 论 9 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 13 文章致谢（模板） 13 正文 MMP9基因多态性与老年动脉僵硬度的相关性研究 文1：MMP9基因多态性与老年动脉僵硬度的相关性研究 基质金属蛋白酶9(mmp9) 是基质金属蛋白酶家族(mmps) 中明胶酶的一种，作为降解血管基底膜中ⅳ型胶原的主要酶类，与动脉僵硬度密切相关。9 c1 562t 是mmp9基因转录启动子上游1 562 bp处存在的c →t 的功能多态性，影响基因转录产生低活性(c/c)和高活性(c、t) 的启动子基因型。臂踝脉搏波传导速度(bapwv)是反映动脉僵硬度的良好指标， mmp9 c1 562t 基因变异的功能多态性与血压正常者的动脉僵硬程度相关〔1〕。本研究应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(pcrrflp)技术，分析mmp9 c1 562t 基因多态性在山东地区老年人中的分布特点，探讨mmp9基因c1 562t多态性与老年动脉僵硬度的关系。 1 研究对象与方法 研究对象 选取山东地区老年人437例，年龄60～95岁。同一医师应用日本科林公司vp1000 动脉硬化测定仪测定受试者bapwv。根据bapwv〔2〕及年龄bapwv曲线分为低bapwv组和高bapwv组。低bapwv组217例，平均年龄(±)岁;高bapwv组220例，平均年龄(±)岁。排除标准：继发性高血压、感染、肿瘤、糖尿病、全身免疫性疾病、严重肝肾疾病者。所有研究对象均来自汉族人群，无血缘关系。 方法 mmp9基因c1562t多态性检测。dna抽提：采肘静脉血5 ml，edta 抗凝，采用低渗盐析法从白细胞中抽提基因组dna，核酸分析仪测定dna浓度，-80℃保存。pcr扩增：mmp9 c1 562t位点及其侧翼区：引物由博尚生物技术公司合成，上游引物5′gcc tgg cac ata gta ggc cc3′;下游引物5′ctt cct aga cag ccg gca tc3′。pcr总反应体系为10 ×buffer 3 μl，mgcl2(25 mmol/ l) μl，dntp (各10 mmol/l) μl，上下游引物各3 μl，dna 模板1 μl，taq dna 聚合酶〔(宝生物工程(大连)有限公司〕1 u，加双蒸水至总体积30 μl 。pcr 反应条件:94℃预变性5 min，94 ℃1 min、68℃ 1 min、72 ℃1 min 35个循环;最后72 ℃延伸5 min。取pcr产物8 μl，%琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色，紫外分析仪检测pcr 产物特异性。 pcr产物的酶切分析：产物回收，纯化，取10 μl 纯化pcr产物，加限制性内切酶paeⅰ(由fermentas mbi 公司提供)10 u，10 ×buffer 3 μl，加双蒸水至总反应体系30 μl， 置于37℃温浴酶切2 h，%琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色，紫外分析仪检测酶切产物基因型。对其中部分病例的pcr 扩增产物，进行切胶纯化，于abi 377 型全自动测 序仪上作dna序列测定，验证c1 562t位点碱基。等位基因频率= (2×纯合子数+ 杂合子数)/(2×受检人群) 。 统计学处理 所有统计资料均输入计算机，用软件分析，计量资料采用x±s表示，计数资料用百分数表示。基因型和等位基因频率用基因计数法，等位基因频率比较及检验基因型频率与hardyweinberg平衡定律符合程度，均用χ2检验。组间一般资料及生化指标的比较采用单因素方差分析、t检验或χ2检验及相关分析等。用多因素logistic 回归分析不同基因型与动脉僵硬发生的关系和消除混杂因素。关联程度用优势比(or) 及其95%可信区间(ci) 表示。 2 结 果 一般临床资料 高bapwv组总胆固醇、血糖明显高于低bapwv组()，见表1。表1 两组一般临床资料　bmi:体重指数;sbp：收缩压;dbp:舒张压;pp：脉压;map:平均动脉压;tc：总胆固醇;tg:甘油三酯;glu:血糖;hdlc：高