第十章 生物传感器.pptVIP

本章课程安排 10.1 生物传感器的基本概念 10.2 生物传感器的特点 10.3 生物反应基本知识 10.4 生物传感器的工作原理及类型 生物传感器的基本概念 用固定化生物成分或生物体作为敏感元件的传感器称为生物传感器（biosensor）。生物传感器并不专指用于生物技术领域的传感器，它的应用领域还包括环境监测、医疗卫生和食品检验等。 生物传感器是用生物活性材料（酶、蛋白质、DNA、抗体、抗原、生物膜等）与物理化学换能器有机结合的一门交叉学科，是发展生物技术必不可少的一种先进的检测方法与监控方法，也是物质分子水平的快速、微量分析方法。 生物传感器的特点 生物传感器可巧妙地利用生物特有的生化反应，有针对性地对有机物进行简便而迅速的测定。它与通常的化学分析法相比，具有以下特点： ① 对被测物有极好的选择性，噪声低； ② 操作简单，需用样品少，能直接完成测定； ③ 经固化处理后，能长期保持其生理活性，传感器可反复使用； ④ 能在短时间内完成测定； ⑤ 不要求样品具备光学透明度； ⑥ 信息是以电信号方式直接输出的，容易实现检测自动化。 生物反应基本知识 10.3.1 酶反应 1．酶的定义 酶是生物体产生的具有催化能力的蛋白质，它与生命活动息息相关。 2．酶的蛋白质性质 “酶是蛋白质”这一论断最早由Sumenr 提出，他在1926年首次从刀豆中提取了脲酶结晶，并证明了这个结晶具有蛋白质的一切性质。 证明酶是蛋白质有四点依据： ① 蛋白质是由氨基酸组成的，而酶的水解产物都是氨基酸，即酶是由氨基酸组成的； ② 酶具有蛋白质所具有的颜色反应，如双缩脲反 应、茚三酮反应等； ③ 一切可使蛋白质变性的因素，如热、酸、碱、紫外线等，同样可以使酶变性失活； ④ 酶同样具有蛋白质所具有的大分子性质，如不能透过半透膜，可以电泳，并有一定等电位点。 3．酶的催化性质 酶是生物催化剂。新陈代谢是由无数的复杂化学反应组成的，这些反应大都在酶的催化下进行。与一般催化剂相比较，酶催化具有如下特点： ① 高度专一性。一种酶只能作用于某一种或某一类物质（被酶作用的物质称为底物），因而有“一种酶，一种（类）底物”之说。 ② 催化效率高。每分钟每个酶分子转换 103～106个底物分子，以分子比为基础，其催化效率是其他催化剂的107～1013倍。 ③ 因为酶是蛋白质，其催化一般在温和条件下进行，极端的环境条件（如高温、酸碱）会使酶失活。 ④ 有些酶（如脱氢酶）需要辅酶或辅基。若从酶蛋白分子中除去辅助成分，酶便不具有催化活性。 ⑤ 酶在体内的活力常常受多种方式调控。这包括基因水平调控、反馈调节、激素控制、酶原激活等。 4．酶作用机理 （1）降低反应活化能 在一个反应开始时，反应底物分子的平均能量水平较低为初态，只有少数分子具有比初态高一些的能量，高出初态的能量称为活化能，使分子进入活化状态，才能开始反应。这些活泼的分子称为活化分子。酶能够大幅度降低反应所需的活化能，这样，大量的反应物分子就能比较容易地进入活化态 ，从而使反应在常温下极快地进行 。 （2）结构专一性 酶催化的专一性是由酶蛋白分子（特别是分子中的活性部位）结构所决定的，根据酶对底物专一性程度的不同，大致可分为三种类型。 第一种类型的酶专一性较低，能作用结构类似的一系列底物，又分为族专一性和键专一性两种。 第二种类型的酶仅对一种物质有催化作用，它们对底物的化学键及其两端均有绝对要求。 第三种类型的酶具有立体专一性，这类酶不仅 要求底物有一定的化学结构，而且要求有一定的立体结构。 （3）酶的活性中心 实验证明，酶的特殊催化能力只局限在它的大分子的一定区域，这个区域就是酶的活性中心，它往往位于分子表面的凹穴中。 （4）“邻近”、“定向”效应 “邻近”效应指两个反应分子的反应基团要互相靠近才能反应。仅仅“邻近”还不够，两个将要反应的基团的分子轨道还要交叉，而交叉的方向性极强，称为“定向”。这样就使得两个分子间的反应变为 分子内的反应，提高了反应速率。 （5）“诱导契合”与“底物变形” 当酶分子与底物分子接近时，酶蛋白受底物分子的诱导，其构象发生有利于