化妆品中丙烯酰胺的检测方法.pdfVIP

附件1 ： 化妆品中丙烯酰胺的检测方法 1 范围 本方法规定了采用液相色谱- 串联质谱法测定化妆品中丙烯酰胺单体（CAS ： 79-06-1 ）的方法。 本方法适用于化妆品中丙烯酰胺单体含量的测定。 2 方法提要 样品经过提取后，用液相色谱- 串联质谱法测定，以多反应离子监测模式进 行监测，采用特征离子丰度比进行定性，丙烯酰胺与内标峰面积比定量。本方法 对丙烯酰胺的检出限为0.00005 µ g，定量下限为0.0002 µ g ；若取0.2 g 样品测定， 本方法对丙烯酰胺的检出浓度为0.005 mg/kg ，最低定量浓度为0.025 mg/kg 。 3 试剂 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为实验室用一级水。 3.1 丙烯酰胺，纯度 ≥ 99.0 % 。 3.2 氘代丙烯酰胺（2,3,3-D3 ），纯度 ≥ 98 % 。 3.3 醋酸铵。 3.4 乙腈，色谱纯。 3.5 甲醇，色谱纯。 3.6 空白化妆品样品：选择不含丙烯酰胺的化妆品作为空白样品。 3.7 乙腈溶液[ φ（乙腈）= 10%] ：量取10 mL 乙腈（3.4 ）置100 mL 量瓶中，加 水稀释至刻度，混匀。 3.8 醋酸铵溶液[c（醋酸铵）= 0.02 mol/L]：称取醋酸铵0.08 g，置50 mL 量瓶中， 加水溶解并定容至刻度，即得浓度约为0.02 mol/L 的醋酸铵溶液。 3.9 丙烯酰胺标准储备溶液[ （丙烯酰胺）= 0.5 g/L] ：称取丙烯酰胺标准品（3.1 ） 50 mg （精确到0.1 mg ）置100 mL 量瓶中，加乙腈溶液（3.7 ）使溶解并定容至 刻度，摇匀，即得质量浓度为0.5 g/L 的丙烯酰胺标准储备溶液。 3.10 丙烯酰胺系列标准溶液：按照表1 操作，分别精密量取一定体积的丙烯酰胺 标准储备溶液（3.9 ）置10 mL 量瓶中，以乙腈溶液（3.7 ）稀释并定容至刻度， 得不同浓度的丙烯酰胺系列标准溶液。 3.11 内标工作溶液：称取氘代丙烯酰胺标准品10 mg （精确到0.1 mg ）置100 mL 量瓶中，加乙腈溶液（3.7 ）使溶解并定容至刻度，摇匀，即得质量浓度为100 μg/mL 的氘代丙烯酰胺储备溶液，然后精密量取氘代丙烯酰胺储备溶液1mL 置50 mL 量瓶中，加乙腈溶液（3.7 ）使溶解并定容至刻度，摇匀，即得质量浓度为2 μg/mL 的氘代丙烯酰胺内标工作溶液。 3.12 丙烯酰胺加入空白样品标准溶液：取空白化妆品样品 6 份，每份约 0.20 g （精确至0.001 g ）于5 mL 塑料离心管中，分别加浓度为2 μg/mL 的内标溶液50 μL，涡旋30 s，再分别加丙烯酰胺系列标准溶液50 μL，涡旋30 s ；然后加0.15 mL 0.02 mol/L 的醋酸铵水溶液，涡旋30 s 。再加2.0 mL 乙腈，涡旋60 s 后，以10000 rpm 离心转速10 min，取上清液，氮气吹干，残渣加2 mL 色谱流动相复溶，涡 旋60 s，以10000 rpm 转速离心5 min，取上清液，经0.45 μm 微孔滤膜过滤后， 滤液作为待测液，备用，使得每克样品中含有丙烯酰胺0.025 μg、0.05 μg、0.25 μg、 1.25 μg、12. 5 μg、25 μg 。 4 仪器 4.1 液相色谱-三重串联四极杆质谱联用仪。 4.2 分析天平：感量0.0001 g 。 4.3 超声波清洗仪。 4.4 高速离心机。 4.5 精密移液器。 4.6 涡旋振荡器。 5. 分析步骤 5.1 样品预处理 称取样品0.20 g （精确至0.001 g ），置5 mL 塑料离心管中，加浓度为2 μg/mL 的内标溶液50 μL， 涡旋30 s；然后加0.15 mL 0.02 mol/L 的醋酸铵水溶液，涡 旋30 s ，再加2.0 mL 乙腈，涡旋60 s 后，以10000 rp 转速离心10 min，取上 清液，氮气吹干，残渣加2 mL 色谱流动相复溶，涡旋60 s ，以10000 rp 转速 离心5 min，经0.45 μm 微孔滤膜过滤后，滤液作为待测液，备用。 5.2 液相色谱-三重串联四极杆质谱联用分析条件 5.2.1 色谱参考条件 色谱柱：Waters Atlantis T3 （3.5