血栓和止血检验进展.ppt

上海第二医科大学附属瑞金医院 上海血液学研究所 王鸿利 血栓与止血检验进展 　　 近年，随着基础理论和实验技术的不断发展，血栓与止血的检验方法及其临床应用也有很大的进展，下面就近年来血栓与止血检验的进展作一简述。 （一）血小板微颗粒检测 血小板被激活后，它以出芽方式形成囊泡或以伪足断裂方式形成血小板颗粒（platelet micropaticle, PMP）。 PMP的体积较正常血小板为小，但有完整的血小板膜结构和功能。 检测血循环中的PMP可较完整地反映血小板参与血栓形成和血液凝固的功能。 检测方法：流式细胞术或微颗粒捕获法。 参考值：58±15/104PLT（山东大学齐鲁医院） （一）血小板微颗粒检测 （一）血小板微颗粒检测 临床意义：PMP主要反映血小板活化或破坏，用于动脉血栓性疾病的检测，它是动脉血栓形成的敏感和特异的分子标志物。 1.急性冠脉综合征（ACS） PMP↑ 2.脑血栓形成 PMP↑ 3.ITP出血的判断指标 4.PNH患者PMP↑ 5.肿瘤患者PMP↑ （二）血小板-白细胞聚集体检测 血小板被激活后，血小板释放P-选择素（P-selectin或GMP-140）。P-选择素与白细胞和（或）单核细胞膜上的P-选择素配体糖蛋白-1（PSLG-1）结合形成血小板-白细胞聚集物和（或）血小板-单核细胞聚集物，是反映动脉血栓形成的特异性标志物之一。 检测方法：流式细胞术。 参考值：15.3±8.5％（PLA/L）瑞典报道 。 临床意义：动物实验和临床研究表明，血小板-白细胞聚集物是更敏感和更特异的血栓标志物。 在胸痛患者中，血小板-白细胞聚集体水平为AMI胸痛组＞非AMI胸痛组＞正常对照组；分别为34.2±10.3％＞19.3±1.4％＞15.3±8.5％ （二）血小板-白细胞聚集体检测 （三）血管性血友病因子裂解蛋白酶活性检测 生理情况下，由血管内皮细胞合成的血管性血友病因子（vonWillebrand factor，vWF）主要受vWF裂解蛋白酶（vWF cleaving proteinase,vWF-CP）的调节。使vWF不能过度地参与血小板的黏附和聚集。因此vWF-CP是限制血栓形成的指标之一。 （三）血管性血友病因子裂解蛋白酶活性检测 vWF-CP为金属蛋白酶ADAMTS亚家族中的一个成员（ADAMTS-13） 检测方法：ELISA法。 参考值：83例正常人 （1）血浆（n＝30） vWF：CBA为2.1％～40.5％（21.9±9.2％） （2）血清（n＝53） vWF：CBA为2.4％～52.0％（20.5±10.8％） （三）血管性血友病因子裂解蛋白酶活性检测 临床意义： 1.血栓性血小板减少性紫癜-溶血性尿毒症 综合征（TTP-HUS）：vWF-CP基因缺陷 或存在抗vWF－CP自身抗体,故vWF-CP↓, 使超大vWF不能降解，导致血栓形成。 其特异性97％，敏感性100％。 2. 血管性血友病（vWD）：血浆 vWF-CBA水平明显低于正常。 3. 恶性肿瘤： vWF-CP活性水平显著低于正常 （三）血管性血友病因子裂解蛋白酶活性检测 （四）双相APTT（biphasic APTT）检测 凝血是一个动态变化的过程，而传统的APTT检测只能提供血液凝固时间这一单个的信息。 双相APTT检测，是在常规APTT检测的基础上，联合利用光度计和分析软件，全程记录血浆凝固前后浊度的变化，并且绘制血液凝固过程中的透光度的波形变化图，可以提供在纤维蛋白聚集体形成之前凝血时间、速率、加速度的变化的多种量化的信息。 （四）双相APTT（biphasic APTT）检测 检测方法：法国生物梅里埃（bioMerieux）公司的MDA血凝分析仪。 双相APTT透射波形图(A: 正常; B: DIC) （四）双相APTT（biphasic APTT）检测 临床意义： 对诊断pre-DIC特别有价值。敏感性为97.6％，特异性为98％。 大于50％的患者在DIC前18h就出现双相APTT的变化。 （五）凝血酶激活的纤溶抑制物检测 　 凝血酶激活的纤溶抑制物（thrombin activatable fibrinolysis inhibitor，TAFI）由肝脏合成 ，经凝血酶-凝血酶调节蛋白复合物（T-TM）作用