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关于膀胱尿路上皮癌组织中Ezrin和Ecadherin的表达
文档信息
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适用:
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目录
TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1
正文 1
文1:关于膀胱尿路上皮癌组织中Ezrin和Ecadherin的表达 1
1 材料与方法 2
2 结果 3
3 讨论 5
文2:膀胱尿路上皮癌组织中Ezrin和Ecadherin的表达 6
1材料与方法 7
参考文摘引言: 11
原创性声明(模板) 12
文章致谢(模板) 12
正文
关于膀胱尿路上皮癌组织中Ezrin和Ecadherin的表达
文1:关于膀胱尿路上皮癌组织中Ezrin和Ecadherin的表达
埃兹蛋白(Ezrin)是ERM家族成员之一,通过连接细胞骨架和细胞膜,对细胞黏附、形态、分化、运动等起重要调节作用。近来研究表明,Ezrin可促进肿瘤转移[1,2]。Ezrin蛋白的C末端与细胞骨架的肌动蛋白相连,N末端则可通过与细胞表面黏附分子cadherin、CD44等连接,调节细胞细胞及细胞细胞外基质之间的黏附,从而影响肿瘤细胞侵袭性等生物学行为[3,4]。钙黏素E(Ecadherin)是一种钙依赖性的具有细胞与细胞黏附特征的黏附分子,在上皮细胞的细胞间连接中起重要作用。目前国内外大多数研究都侧重于Ecadherin在各系统恶性肿瘤侵袭及转移中的作用,而对Ezrin的异常表达在膀胱恶性肿瘤转移中的作用鲜有报道。本研究采用免疫组化法检测人膀胱尿路上皮癌组织中Ezrin和Ecadherin异常表达情况,旨在探讨它们在膀胱尿路上皮癌侵袭转移中的作用。
1 材料与方法
材料
标本 选取1995年1月~2006年12月青岛大学医学院附属医院泌尿外科手术切除并经病理证实为膀胱尿路上皮癌(BUC) 的肿瘤标本80例。80例膀胱癌病人中男64例, 女16例;年龄37~76岁,平均岁。行 TURBt 术 28例,膀胱部分切除术42例, 膀胱全切术10例。肿瘤临床分期按TNM标准:Tis~T1者34例,T2~T4者46例。肿瘤病理分级按WHO分级标准:Ⅰ级18例,Ⅱ级28例,Ⅲ级 34例。就诊时有复发者22例。术后证实有淋巴结或局部转移者26例。正常对照组12例,包括良性前列腺增生症8例,输尿管囊肿3例,膀胱阴道瘘 1 例, 病人经膀胱手术时所取膀胱壁组织均经病理检查证实为正常膀胱黏膜组织。上述标本组织用40 g/L多聚甲醛固定,石蜡包埋,实验时连续切取厚 5、6 μm 的切片。
主要试剂 鼠抗人Ezrin(MS661)购自NeoMarke公司,鼠抗人Ecadherin(ZM0092)、SP免疫组化超敏试剂盒和显色试剂盒(DAB kit)购自福建迈新生物技术公司。
方法
检测方法 按说明书步骤,采用免疫组化SP法染色。抗原修复采用微波法。以 mol/L PBS液代替一抗作阴性对照,以Ezrin、Ecadherin蛋白阳性的正常膀胱黏膜组织作阳性对照。显微镜下随机选取5个视野,每个视野计数1 000个细胞。
免疫组化阳性结果判断 Ezrin阳性着色在膀胱尿路上皮癌细胞膜和细胞浆内,呈棕黄色颗粒,均一弥漫性分布。按染色强度和阳性表达细胞数,参考MATHEW等[5]分级标准: 无表达为(-);阳性表达细胞50%或染色较浅为(+);阳性表达细胞≥50%且深染为()。()为异常表达。Ecadherin染色结果的判断标准:细胞膜出现黄色或棕黄色的细小颗粒着色为阳性细胞。参照GONZALEZ等[6]的判断标准,根据阳性细胞所占的百分率判断: 无着色为(-);阳性细胞率75%为(+);阳性细胞率≥75%为()。()为表达正常;(+)~(-)为表达减弱或缺失,为异常表达。
统计学处理 应用SPSS 统计软件包,采用卡方检验及Spearman等级相关分析。
2 结果
Ezrin和Ecadherin在正常膀胱黏膜组织中的表达
在正常膀胱黏膜组织中,Ezrin和Ecadherin主要分布在膀胱黏膜上皮细胞胞膜,呈阳性棕黄色颗粒着色。Ezrin在正常膀胱黏膜组织中均为弱表达或表达缺失,钙黏素E在正常膀胱黏膜组织中均为强表达。
Ezrin在膀胱尿路上皮癌组织中的表达
Ezrin在部分膀胱尿路上皮癌组织胞膜中呈强阳性表达,也有部分在胞浆内呈弥漫性强阳性。在80例膀胱尿路上皮癌中有48例(%)Ezrin异常表达,其中在54例无转移的癌组织中有28例(%)异常表
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