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三、酶原的激活 酶原(Zymogen):有些酶(绝大多数为蛋白酶)在细胞内合成及初分泌时,没有活性 酶原的激活:在一定条件下,酶原可转化成有活性的酶。酶原激活的机制是分子内肽键一处或多处断裂,使分子构象发生一定程度改变,从而形成酶的活性中心。 酶原激活也存在级联反应。 胰蛋白酶原 肠激酶 胰蛋白酶+六肽 胰凝乳蛋白酶原 胰蛋白酶 α-凝乳蛋白酶+两个二肽 羧基肽酶原 胰蛋白酶 羧 基肽酶 A+几个碎片 同工酶(isoenzyme) 同工酶:指催化相同的化学反应,而酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。由不同基因或等位基因编码的多肽链所组成,或由同一基因转录生成的mRNA翻译成不同多肽链组成的蛋白质。同工酶存在 于同一种属或同一个体的不同组织或同一细胞的不同亚细胞结构中。 乳酸 丙酮酸 乳酸脱氢酶(LDH):由H或M两种亚基组成的四聚体。五种同工酶LDH1(H4)、LDH2(H3M)、LDH3(H2M2)、LDH4(HM3)、LDH5(M4),它们向正极泳动的速度由LDH1~ LDH5依次递减,可藉此分离。 乳酸 丙酮酸 心肌: LDH1 乳酸 丙酮酸 LDH5 骨骼肌: 同工酶虽然催化相同的反应,但可有不同的功能 。 心肌中含量最多的是LDH1(H4)对NAD+有较大的亲和力,易受丙酮酸抑制,它的作用主要是催化乳酸脱氢生成丙酮酸,有利于心肌利用乳酸氧化供能。 骨胳肌中含量多的LDH5,对NAD+亲和力低,不受丙酮酸的抑制,其作用是催化丙酮酸加氢生成乳酸,有利于骨胳肌生成乳酸。 第五节 多酶体系 一、概念和分类 细胞中的许多酶常在一个连续的反应链中相互联系在一起,这种由几个酶形成的反应链称为“多酶体系”。 1、可溶性类型:多酶体系中的各种酶在细胞质中以可溶性形式各自独立存在,没有结构上的联系; 2、结构化类型:多酶体系中的各种酶彼此有机地组合在一起,形成多酶复合体。如丙酮酸脱氢酶复合体(p297) 3、定位于细胞器结构的类型:如呼吸链中的酶定位于线粒体的内膜上。 HSCoA E 3 :二氢硫辛酸脱氢酶 E 2 :转乙酰化酶 E 1 :丙酮酸脱氢酶 E 3 E 2 E 1 N A D + NADH+H + F A D H 2 F A D C H 3 C 珆 S C o A O H S L H S S L S 珆 S L H S C H 3 C O C H 3 C T P P O H H T P P C O 2 C H 3 C C O O H O 二、自我调节 1、酶促反应序列:1)直线式;2)分枝式;3)循环式。 2、限速步骤:多酶体系的总速度决定于其中反应速度最慢的一个反应,这个速度最慢的酶限制着全部反应序列的速度,称为限速步骤。大部分具有自我调节能力的多酶体系的第一步反应就是限速步骤。 3、反馈作用:第一步反应的酶被全部反应序列的最终产物或反应序列分叉处的酶被最终产物所抑制,这种过程称为反馈作用。 4、受反馈调控的酶往往是别构酶。 有的别构酶有“正调节物”,酶活性被激活(底物); 有的别构酶有“负调节物”,酶活性被抑制(最终产物); 有的别构酶则正负调节物兼而有之。 有的别构酶只有一个专一性的调节物,称之为单价别构酶; 有的别构酶有两个或更多的专一性调节物,称之为多价别构酶。 二、酶浓度对反应速度的影响 在酶促反应体系中,当底物浓度大大超过酶的浓度,使酶被底物饱和时,反应速度与酶的浓度变化成正比关系。V=K3[E]。 V [E] 三、温度对反应速度的影响 温度较低时,反应速度随温度升高而加快,温度超过一定数值后,酶受热变性,反应速度反而减慢,形成倒V型曲线,在此曲线顶点所代表的温度时反应速度最大,称为最适温度(optimum temperature)。 酶的最适温度不是酶的特征常数,它与反应进行的时间有关。 低温一般不使酶破坏。温度回升后,酶可以恢复活性。低温麻醉、低温保存菌种、低温保存酶制剂。 温度系数:在达到最适温度之前提高温度,可增加反应速度。反应温度提高10℃,其反应速度与原来的反应速度之比称为反应的温度系数(Q10)。 酶 活 性 温度 pH可影响酶分子尤其是活性中心上必需基团和催化基团的解离程度,也可影响底物和辅酶的解离程度,从而影响酶与底物的结合。在特定pH条件下,酶、底物和辅酶的解离情况适宜于相互结合,使酶反应速度达到最大值,这个pH称为最适pH(optimum pH )。 动物体内多数酶的最适pH接近中性。 最适pH不是酶的特征常 数,它受底物浓度、缓 冲溶液的种类
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