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两种方法测定土壤中过氧化氢酶比较
两种方法测定土壤中过氧化氢酶比较
2945〔2021〕15-0145-03
Abstract：Soilcatalaseactivitycanbeusedtocharacterizethetotalbiologicalactivityandfertilityofsoil.Inordertoexploreanefficient，accurateandsuitablemethodforthedeterminationofsoilcatalase，twomethodsforthedeterminationofcatalasewerestudiedandcomparedinthispaper.Theresultsshowedthatthelinearrelationshipandconcentrationadaptationrangeofthetwomethodsforthedeterminationofcatalaseactivitywerealmostthesame，andthedetectionlimitofUVspectrophotometrywasslightlylowerthanthatofpotassiumpermanganatetitration.Thecatalaseactivitiesoffourdifferenttypesofsoilsweredeterminedbytwomethods.Theresultsshowedthatthestabilityandreproducibilityofcatalaseactivitiesweregood，andtherewasnosignificantdifferencebetweenthetwomethods.
Keywords：catalaseactivity;soil;potassiumpermanganatetitration;UVspectrophotometry
1试验部分
1.1试验原料、试剂与仪器
原料：四川省泸州市古蔺县某区域土壤。
试剂：〔1〕0.3%的过氧化氢溶液：将30%的过氧化氢溶液稀释100倍，其浓度用标准高锰酸钾溶液标定。
〔2〕1.5mol/L硫酸：取42mL浓硫酸稀释至500mL。
〔3〕饱和明矾溶液：明矾在20℃溶解度为10.84g，30℃的溶解度为15.41g。
〔4〕0.02mol/L高锰酸钾溶液：称取3.16g高锰酸钾，溶解后定容至1L，其精确浓度用标准草酸钠溶液标定。
仪器：HY-5回旋振荡器，UV752型紫外可见分光光度计。
1.2试验步骤
1.2.1高锰酸钾滴定法测定土壤过氧化氢酶操作步骤
称取2.00g土壤于锥形瓶中，加入40mL蒸馏水和5mL0.3%的H2O2溶液，马上加塞密封。振荡20min后加入1mL饱和明矾溶液，马上过滤于盛有5mL1.5mol/L的硫酸溶液的三角瓶中，滤干后，吸取滤液25mL，用0.02mol/L高锰酸钾标准溶液滴定至紫红色，同时做无土对比试验。
其中：E：20min内每克土壤分解的H2O2的毫克数表示酶活性;V：为滴定空白所用的KMnO4体积;VS：为滴定样品所用的KMnO4体积;C：为KMnO4浓度;V0：为滴定体积25mL;W：为土重。
1.2.2紫外分光光度法测定土壤过氧化氢酶操作步骤
称取土样2.00g于锥形瓶，加入40mL蒸馏水和5mL0.3%的H2O2溶液，马上加塞密封。振荡20min后加入1mL饱和明矾溶液，马上过滤于盛有5mL1.5mol/L的硫酸溶液的三角瓶中，滤干后，将滤液直接在240nm处用1cm石英比色皿测定吸光度，同时做无土和无基质对比试验。
其中：E：20min内每克土壤分解的H2O2的毫克数表示酶活性;T0：样品空白的H2O2的质量;T剩：样品里反应剩下的H2O2的质量;W：样品的称样量;A0：样品空白的吸光度;A：样品的校正吸光度;Ak：对应样品的无基质的吸光度;a：校准曲线截距;b：校准曲线的斜率。
2结果分析与商量
2.1两种测定过氧化氢酶方法的检出限比较
方法检出限即用特定分析方法在给定的置信度内可从样品中定性检出待测物质的最低浓度或最小量。本试验做了相关的检出限试验，参考HJ168-2021环境监测分析方法标准制修订技术导则附录A中的方法。结果如表1所示。
表2中说明，高锰酸钾滴定法测定土壤中过氧化氢酶方法的检出限为0.18mg/g，紫外分光光度法测定土壤中过氧化氢酶方法的检出限为0.14mg/g，两种方法测定过氧化氢酶含量的相对偏差均小于10%。
2.2两种测定过氧化氢酶方法的重现性和稳定性比较取6件土壤样品，编号为：T-1、T-2、T-3和T-4，由2名分析人员同时分别用紫外分光光度法和高锰酸
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