植物组织培养第一章绪论.ppt

第六十二页，共一百零二页。 三、根芽激素理论 激素是影响器官建成的主要因素。 受内源激素和外源激素的共同影响。 一般地，生长素/分裂素=高，促进生根； 生长素/分裂素=低，促进茎芽分化； 生长素/分裂素=适中，无结构的生长方式。 第六十三页，共一百零二页。 外植体 愈伤组织 芽 根 再生植株 脱分化 再分化 高生长素(2,4-D) 高(生长素/细胞分裂素) 低(生长素/细胞分裂素) 第六十四页，共一百零二页。 四、组培苗遗传稳定性的问题 是组培中常遇到的一个重要问题 （一）影响因素 1、基因型 2、继代次数和继代时间 3、发生方式 4、外源激素 第六十五页，共一百零二页。 （二）减少变异，提高遗传稳定性的措施 1、采用生长点、腋芽生枝、胚状体繁殖方式； 2、缩短继代时间和限制继代次数； 3、取幼龄的外植体为材料； 4、采用适当的激素种类和较低的浓度； 5、减少使用易引起诱变的物质； 6、定期检查，发现变异者应予与淘汰。 第六十六页，共一百零二页。 §1-3 植物组织培养的发展和应用 一、发展简史(略) 1、探索阶段：19世纪中期至20世纪30年代（1838-1930年） ★1838年初步提出全能性概念， ★1853年离体茎段、根段获得愈伤组织，但未获得完整植株， ★ 1901年正式提出全能性概念，White对此概念做解释， ★ 1902年 Haberdandt首先进行植物组织培养，未或成功； ★ 1922年Knudson 兰花无菌播种； 第六十七页，共一百零二页。 第六十八页，共一百零二页。 2、奠基阶段：20世纪30年代至50年代末（1930-1965年） ★1934年 White 蕃茄根尖培养，可以继代培养，并发现VB； ★ 1941年 植物添加物的使用； ★ 1948年 Skoog and Tsui烟草培养产生不定根或不定芽，取取决于auxin 及 adenin的比例，并发现6-BA ; ★ 1954年 Muir等人成功的由单细胞培养产生再生植株; ★ 1958年胡萝卜获得胚状体； ★ 1962年 Murashige and Skoog MS培养基配方； ★ 1965年细胞培养获得完整植株，证实了全能性。 第六十九页，共一百零二页。 第七十页，共一百零二页。 3、蓬勃发展阶段：20世纪60年代至今（1965年-至今） ★1966年、67年烟草、胡萝卜小孢子培养获得单倍体植株； ★ 1971 Takebe等人 原生质体培养产生再生植株，证实了细胞分化全能性。 第七十一页，共一百零二页。 第七十二页，共一百零二页。 初代培养：将外植体进行的第一次培养。 继代培养：外植体或培养物培养了一段时间后，为了防止培养的细胞老化，或培养基养分利用完而造成营养不良及代谢物过多积累而产生毒害物质的影响，要及时将其转接到新鲜培养基的过程。转接培养，转接一次称为一代，依次类推。 继代培养的目的：快繁 初代培养的目的：获得无菌材料 第三十页，共一百零二页。 继代培养 初代培养 继代培养 第三十一页，共一百零二页。 初代培养和继代培养 不断地继代培养 第三十二页，共一百零二页。 植物组织培养的类型（三） 培养基的 物理状态 固体培养 液体培养 双相培养 第三十三页，共一百零二页。 固体培养：加入琼脂等凝固剂使培养基成固体状态的培养。 优点：是最常用的方法。该方法简单，易行，能较好地固定培养物。 缺点：但养分分布不均，营养成分不能得到充分利用，生长速度不均衡，并常有褐化中毒现象发生。 产生的有害物质不能及时清除。 第三十四页，共一百零二页。 固体培养 固体培养 第三十五页，共一百零二页。 液体培养：在培养基中不加入任何的凝固剂使培养基呈流体状态的培养，由于液体中氧气含量较少，常用振动培养的方法以确保氧气的供给。 往复式摇床或旋转式摇床进行培养，速度一般为50-200r／min，这种定期浸没的方法，既能使培养基均一，又能保证氧气的供给。 缺点：不能较好地固定培养物， 优点：营养成分得到充分利用，产生的有害物质能及时清除 第三十六页，共一百零二页。 液体培养：在培养基中不加入任何的凝固剂使培养基呈流体状态的培养，由于液体中氧气含量较少，常用振动培养的方法以确保氧气的供给。 往复式摇床或旋转式摇床进行培养，速度一般为50-200r／min，这种定期浸没的方法，既能使培养基均一，又能保证氧气的供给。 缺点：不能较好地固定培养物， 优点：营养成分得到充分利用，产生的有害物质能及时清除 第三十七页，共一百零二页。 液体培养 摇床 第三十八页，共一百零二页。 双相培养：固体、液体混合培养，协调了固体