表面活性剂在生物学或生物化学实验室使用的去污剂都是作用比较温和活.pdfVIP

表面活性剂 在生物学或生物化学 使用的去污剂都是作用比较温和的表面活性剂 （=表 面活性成分），是用来破坏细胞膜（裂解细胞）以 细胞内的可溶性物质。它 们可以破坏蛋白质-蛋白质、蛋白质-脂质、脂质-脂质之间的连接，使蛋白质发 生结构上的变性，防止蛋白质结晶，另外在免疫学实验中还可避免非特异性吸附。 去污剂根据其特性可以分为好几类，因此科学研究中去污剂的选择很关键，取决 于后续研究的具体内容。 实际应用中有众多不同的去污剂可以选择。为了某些特殊的应用，新的去污剂被 不断开发出来。在这篇综述中，对一些最常用的去污剂的特点和应用进行了论述。 去污剂是由一个疏水尾端基团和一个极性亲水头端基团组成的有机化合物（图一 A）。在一定的温度条件下，以特定浓度溶解于水时，去污剂 会形成胶束， 疏水基团部分位于胶束内部，而极性亲水基团则在其外部（图一B）。因此，胶 束的疏水中心会结合到蛋白的疏水区域。一个胶束中，去污剂 的 数目， 是用来评价膜蛋白溶解度的一个重要参数。去污剂 疏水区域的长度和其疏水 性成正比，且去污剂的疏水区域非常恒定，而极性头端亲水基团是可变的，可据 其特点，把去污剂分为三类：离子型（阴离子或阳离子型），两性离子型和非离 子型（见表一）。在特定的温度下，表面活性剂 缔合形成胶束的最低浓度， 称之为临界胶束浓度（CMC）。当去污剂低于临界胶束浓度时，只有单体存在； 当高于临界胶束浓度时，胶束、单体以及其余不溶于水的非胶束相共存。同样， 胶束形成的最低温度称为临界胶束温度（CMT）。因此，温度和浓度是去污剂两 相分离和溶解性的重要参数。一般来说，低亲脂或憎油的去污剂的临界胶束浓度 会较高。 表一：去污剂的分类。 种类 化合物 离子去污剂 十二烷基硫酸钠（SDS），脱氧胆酸钠， 胆酸钠， 肌氨酸 非离子去污 triton X-100， 十二烷基麦芽糖苷，洋地黄皂苷， tween 20， 剂 tween 80 两性离子去 CHAPS 污剂 离液剂 尿素 图 1. 去污剂单体的一般结构 离子去污剂 离子去污剂是由一个亲水链和一个阳离子或阴离子的极性头端基团组成。此类去 污剂的临界胶束浓度一般高于非离子去污剂。此类去污剂活性较强。 十二烷基硫酸钠（SDS）阴离子去污剂： SDS 是一种非常高效的表面活性剂，几 乎可以使所有的蛋白质溶解。它可以破坏蛋白质的非共价键，从而使蛋白质变性， 并丧失天然构象和功能。SDS 以质量比1.4:1 与蛋白质结合（或一个SDS 阴离子 结合二个氨基酸 ），因此即使蛋白质样品处于等电点，SDS 也能掩饰蛋白质 此带电情况，使其带负电。这是被广泛使用的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理所 在。通常，为了在SDS 存在时完全裂解细胞，样品必须经过超声处理或若干次通 过19G 的针头，从而确保DNA 的完全降解。SDS 会使蛋白质变性并破坏其三维结 构，因此当研究中需要蛋白质的活性或蛋白质的相互作用存在时，不能使用SDS。 当使用离子去污剂时，此外还要注意一些事项，因为在不同离子强度的缓冲液中， 它们的特性会随之改变（比如说，当氯化钠浓度从0 增加到500mM 时，去污剂的 临界胶束浓度会从8mM 降至0.5mM。另外，SDS 在温度较低时会发生沉淀，这是 因为它属于去污剂中临界胶束温度最高的一种，而且这种沉淀现象在钾盐存在的 情况下会更加明显。SDS 的这种特性可以用来去除蛋白质样品中的SDS。脱氧胆 酸钠和胆酸钠即使没有一个极性头端基团，但是也归入离子去污剂的类别，是因 为它们的极性基团分布在 链的各个部分。它们可以用来溶解细胞膜。由于离 子去污剂存在极性头部基团，因此不能通过离子交换色谱法去除它。 非离子去污剂 非离子型去污剂的头端基团是没有极性的亲水基团。它们被认为是比较温和的表 面活性剂，它们可以破坏蛋白质-脂质以及脂质-脂质之间的连接，但是不能破坏 蛋白质-蛋白质的连接，而且大多非离子去污剂不能使蛋白质