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关于cmyc在鼻腔内翻乳头状瘤中的表达及临床意义 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：关于cmyc在鼻腔内翻乳头状瘤中的表达及临床意义 1 1 材料和方法 2 2 结果 4 3 讨论 5 文2：βCatenincyclinD1及cmyc在肝细胞癌中的表达临床医学论文 6 0 引言 6 1 资料与方法 6 1．2．2 临床随访观察 7 1．2．3 结果判定 7 2 结果 8 3 讨论 10 参考文摘引言： 12 原创性声明（模板） 13 文章致谢（模板） 13 正文 关于cmyc在鼻腔内翻乳头状瘤中的表达及临床意义 文1：关于cmyc在鼻腔内翻乳头状瘤中的表达及临床意义 鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤( sinonasal inverted papilloma ，SNIP) 是发生于鼻腔鼻窦的粘膜上皮源性良性肿瘤，其病理组织学为良性，但具有恶性生物学行为，呈侵袭性生长，局部破坏性强，易复发和恶变，据报道其复发率从30 %～ 78 %不等， 恶变率从5 %～21 %不等[1]，探讨影响其发生的因素一直是临床及病理医师关注的焦点。原癌基因cmyc自发现以来一直受到人们的广泛重视， 它不但参与了细胞的重要活动增殖，分化与凋亡，而且还涉及了人类肿瘤的发展和演进[2，3]。本研究采用免疫组化方法检测cmyc在鼻腔内翻乳头状瘤与正常粘膜组织中的表达，旨在探讨cmyc在鼻腔内翻乳头状瘤的发生中的表达及意义。 1 材料和方法 材料 材料来源 收集武汉市中心医院病理科2000～2007年鼻腔内翻乳头状瘤存档蜡块20例，其中男性13例，女性7例。所有切片经病理学专家诊断为鼻腔内翻乳头状瘤。另取瘤组织周围组织5例作对照。 材料分组 将实验分为鼻腔内翻乳头状瘤组和对照组。 主要试剂和仪器 主要试剂 浓缩型鼠抗人cMyc 单克隆抗体，(北京中山生物技术有限公司);超敏即用型SP通用型免疫组织化学试剂盒(福州迈新公司);DAB显色试盒及多聚赖氨酸(北京中山生物技术有限公司) 主要仪器 YWY781型医用微波仪，250 W，50 Hz (浙江临安电子器材厂生产);家用高压锅;电热恒温干燥箱 (湖北黄石医疗器械厂生产);显微镜成像系统 (Olympus公司) 方法 蜡块切片厚5μm，贴片于涂有多聚赖氨酸的洁净载玻片上，置于烤箱烤干待用。 免疫组织化学SP法检测cmyc相关抗原 具体步骤： ① 4μm组织切片常规脱蜡至水后， PBS(pH )漂洗3×3 min; ② 抗原修复(柠檬酸缓冲液微波抗原修复法)，室温自然冷却后， PBS(pH )漂洗5×3 min; ③ 滴加3%过氧化氢，37℃湿盒孵育10min以抑制内源性过氧化物酶活性， PBS(pH )漂洗3×3 min; ④ 正常羊血清37℃湿盒孵育10min以减少非特异性背景; ⑤ 甩去多余血清，分别滴加一抗，4℃孵育过夜， PBS(pH )漂洗3×5 min; ⑥ 滴加生物素标记的二抗37℃湿盒孵育10min， PBS(pH )漂洗3×3 min; ⑦ 滴加链霉素抗生物素蛋白过氧化物复合物37℃湿盒孵育10min， PBS()漂洗3×3 min; ⑧ 滴加新鲜配置的DAB显色液显色，光镜下控制反应时间(约3～5min)，自来水冲洗终止反应; ⑨ 苏木素复染，流水冲洗，1%盐酸酒精分色数秒，流水冲洗，%氨水返蓝; ⑩ 梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片并镜检; 用PBS代替一抗作为阴性对照组，购买的阳性片作为阳性对照组。 免疫组织化学结果判断 cMyc 以胞核或胞质出现棕黄色颗粒为阳性反应。阴性对照组除细胞核染成蓝色外，应无棕黄色反应物。 采用HPIAS1000 高清晰度彩色病理图文报告管理系统(同济千屏影像公司)对cMyc的表达进行定量分析，每张切片随机选取5个完整而不重叠的高倍镜视野(×400) ，测定每个视野下阳性反应的平均光密度、阳性反应面积和所有细胞总面积，计算阳性面积率(阳性面积率=单位面积中阳性反应的总面积/单位面积中细胞的总面积×100%)。以每例5个视野的平均光密度、阳性面积率的平均值作为该例的测量值。 统计学处理 数据以均数±标准差表示，用SPSS11. 5 软件对各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度、阳性面积率做单因素方差分析和SNK(q) 检验，检验水准α为。 2 结果 瘤细胞核和细胞质中有大量棕黄色颗粒， cMyc 表达强; 对照组中，粘膜细胞核及细胞质中仅有少量棕黄色颗粒， cMyc 表达弱。图像分析结果显示: 鼻腔内翻乳头状瘤cMyc表达的平均光密度为±， 对照组cMyc表达的平均光密度为±;鼻腔内翻乳头状瘤c