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蝙蝠葛酚性碱对BXPC3裸鼠抑瘤作用及对VEGF表达的影响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：蝙蝠葛酚性碱对BXPC3裸鼠抑瘤作用及对VEGF表达的影响 1 1 材料与方法 2 2 结果 4 3 讨论 5 文2：蝙蝠葛酚性碱对BxPC3裸鼠的抑瘤作用及对bFGF表达的影响 5 1 材料与方法 6 2 结果 9 3 讨论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 11 正文 蝙蝠葛酚性碱对BXPC3裸鼠抑瘤作用及对VEGF表达的影响 文1：蝙蝠葛酚性碱对BXPC3裸鼠抑瘤作用及对VEGF表达的影响 【Abstract】 Objective To explore the effects of phenolic alkaloids from menispermum dauricum(PAMD)on tumor inhibitory and expression of basic fibroblast growth factor(VEGF)in BXPC3 nude mice and to further investigate its protective mechanism for pancreatic The metastatic tumor model of nude mice was established with BXPC3 cell PAMD treatment，the inhibition rate of tumor proliferation was detected and immunohistochemistry was carried out to confirm the expression of VEGF in nude PAMD could inhibit the tumor growth of tumorbearing mice of BXPC3 cell line(P 【Key words】 phenolic alkaloids from menispermum dauricum;vascular endothelial growth factor;immunohistochemistry;BXPC3 胰腺癌是消化系统恶性程度高、预后最差的肿瘤，其发病率有逐年增多的趋势。由于早期缺乏敏感和特异的诊断指标，症状缺乏特异性，易发生早期转移，其侵袭性的分子机制仍不清楚，因此胰腺癌在临床中难以早期诊治，绝大多数患者在确诊时已属晚期，其外科手术切除率很低，术后生存率亦很低[12]。本实验采用胰腺癌BXPC3细胞株建立裸鼠胰腺癌模型，观察PAMD的抑瘤作用及其对肿瘤新生血管的影响，探讨其抗肿瘤作用机制及在肿瘤治疗中的应用价值，现将研究结果报道如下。 1 材料与方法 动物 裸鼠，体重18～22 g，雌雄各半，由黑龙江中医药大学安全性评价中心提供，合格证:SCXK(京)20070001.裸鼠自由进食、饮水，在黑龙江中医药大学药物安全性评价中心无菌条件下饲养。 药物与试剂 蝙蝠葛酚性碱(PAMD)，黑龙江中医药大学药学院王栋教授提供，含量为83%，用时先以1 mol/L HCl溶解，再用1 mol/L NaOH调pH值至中性，加蒸馏水至所需浓度。实验时临时配制成溶液;注射用环磷酰胺(Cyclophosphamide For Injection)，江苏恒瑞医药股份有限公司，批准文号:国药准字H;生理盐水，哈药集团制药六厂，批号:071003B11。 胰腺癌瘤株BXPC3由中国科学院上海生科院细胞资源中心提供。VEGF兔抗鼠多克隆抗体、山羊抗兔IgG抗体HRP多聚体、SP9003检测试剂盒、PV6001两步法检测试剂盒、DAB显色剂均由南京建成生物技术有限公司生产。 主要实验仪器 生物组织包埋机(湖北孝感);电热恒温箱培养箱DPX9162B1;轮转式组织切片机俫佧2135型;研究用生物显微镜Olympus BX60;电子天平(AL204，METTLEY TOLEDO，Switzerland);超净工作台BIOLOGICAL Safety Cabinets Class Ⅱ Nikon digital camera DXm1200F HⅢE600;格兰仕中型机型微波炉WP700。 动物模型的构建 取冻存的胰腺癌细胞株BXPC3，立即投入37 ℃水中，1 min内融化，然后离心去冻存液，用约10倍的冷RPMI1640完全培养液洗1次，接种于培养瓶，待细胞贴壁后更换培养液。将肿瘤细胞株培养在RPMI1640完全培养液中，置于37 ℃、饱和湿度